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啦啦啦啦了

新虫 (正式写手)

[求助] 以紫外测总黄酮含量，必须先显色吗 已有1人参与

请问以紫外分光光度计测定制剂中总黄酮含量（以芦丁为指标），必须先显色吗？之前显色，感觉辅料有干扰，没法测出来。
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1楼 2016-01-10 17:33:44
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
啦啦啦啦了: 金币+5, ★有帮助 2016-01-24 12:52:12
紫外分光光度计测定总黄酮含量一般都要显色，如果辅料有干扰可以考虑用聚酰胺吸附以后，除掉辅料，在洗脱下来，进行检测
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2楼2016-01-10 18:30:46
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啦啦啦啦了

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-01-10 18:30:46
紫外分光光度计测定总黄酮含量一般都要显色，如果辅料有干扰可以考虑用聚酰胺吸附以后，除掉辅料，在洗脱下来，进行检测

为什么不能直接测定？我测了几次，都能测出来，感觉与显色比较还方便。看到过解释，说显色是利用与显色剂形成吸收明显的络合物。

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3楼2016-01-10 23:09:24
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化
为什么一定要显色，可以这么解释，假如你选用280nm作为检测波长，那么其他不是黄酮类的化合物在这个波长下也会有吸收，会造成测定不准确，如果选用专属型的显色剂，只有黄酮类的化合物被显色，这样就可以排除其他不是黄酮类化合物的干扰了

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4楼2016-01-10 23:47:52
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啦啦啦啦了

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 普思生物 at 2016-01-10 23:47:52
为什么一定要显色，可以这么解释，假如你选用280nm作为检测波长，那么其他不是黄酮类的化合物在这个波长下也会有吸收，会造成测定不准确，如果选用专属型的显色剂，只有黄酮类的化合物被显色，这样就可以排除其他不 ...

是不是可以理解为纯度较高、杂质较低就可以不显色直接测呢？
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5楼2016-01-11 13:50:12
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普思生物

专家顾问 (著名写手)

中药对照品，天然产物分离纯化
引用回帖:
5楼: Originally posted by 啦啦啦啦了 at 2016-01-11 13:50:12
是不是可以理解为纯度较高、杂质较低就可以不显色直接测呢？...

理论上只要杂质的紫外吸收不是在选的黄酮吸收波长上有响应，就可以直接显色，但是一般测总黄酮的，都是混合物，很难保证你要测的样品中不含有对你有干扰的杂质
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6楼2016-01-11 14:54:37
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wintersmile

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 啦啦啦啦了 at 2016-01-10 23:09:24
为什么不能直接测定？我测了几次，都能测出来，感觉与显色比较还方便。看到过解释，说显色是利用与显色剂形成吸收明显的络合物。
...

同问，我测黄酮含量的时候用的是显色法，但却没有明显的最大吸收峰，这是怎么回事呢？
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7楼2016-12-26 21:43:31
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