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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 3'RACE求助
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)

[求助] 3'RACE求助 已有4人参与

大家的3‘RACE的反应体系是什么啊？我的一直跑不出来。。。
我是10微升rTaq酶，8.5微升水，各0.5的接头引物，内外引物和模板（感觉是不是模板加的少了，原来师姐用这个体系跑出来过）。
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1楼 2016-01-06 10:03:18
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hmz2007 at 2016-01-07 13:55:54
我是一次一排梯度，温度差在八度左右，用普通taq 酶的商品化mix ，还是很快的，有时候会有错配，难免的，巢式扩增，一般第二次就能看见条带了

确实是啊，我今天也试了一下，虽然不是我的目的条带，但最起码有带了
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7楼2016-01-07 17:43:38
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凯伦爱佳佳

金虫 (正式写手)
大神在哪里~~求安慰!!
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2楼2016-01-06 20:05:06
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hmz2007

银虫 (正式写手)
巢式PCR 基本都能出来

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3楼2016-01-06 23:59:23
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hmz2007

银虫 (正式写手)
我一般做梯度加巢式PCR ，目前只有两次失败，反转录用的接头型oligodt 引物直接合成，然后反转录，就很多模板了

发自小木虫Android客户端
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4楼2016-01-07 00:01:33
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