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chenmimi

新虫 (正式写手)

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[求助] 用C18色谱柱为什么分不开乳酸与乙酸？换了好多流动相，还是没分开，求指教。已有8人参与

根据国标：流动相：乙腈与0.1%磷酸2.5:97.5（v:v)
            C18色谱柱  150x4.6x5nm
            波长：210nm
               曾换了好多流动相结果发现分离效果不好，所以就参考国标做一下，结果还是分不开。不知是C18柱分不开有机酸的原因还是流动相没选好的原因？我用的色谱只有一个泵，不能梯度洗脱。第一次做，也不懂。发此贴，希望向你们请教请教。

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1楼 2016-01-05 14:22:20

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irvine2015

木虫 (著名写手)

应助: 57 (初中生)
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性别: GG
专业: 质谱分析

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

方法1：色谱柱: Dionex Acclaim OA, 5µm, 4x250mm, 流动相：100 mM Na2SO4 (pH 2.65,用甲磺酸调节), 柱温: 30C, 波长：210nm; 注射量: 5µL, 流量: 0.6 mL/min, 保留时间: 6-7 min

方法2：色谱柱: PerkinElmer Brownlee Aqueous C18, 5µm, 4.6x250mm (PN N9303549), 流动相：MPA: 10 mM KH2PO4 (pH 2.4,用磷酸调节), MPB: 乙腈, 柱温: 30C, 波长：210nm; 注射量: 20µL,流量: 1.5 mL/min,保留时间: 2 min, Gradient: 0-10 min: 20->60%MPB;

方法3：色谱柱: BioRad Aminex HPX-87H, 300x7.8 mm, 流动相：5mM 硫酸, 柱温: 50C, 波长：210nm/RI 检测器; 注射量: 20µL,流量: 0.6 mL/min,保留时间: 8-10 min;