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可可love92

新虫 (初入文坛)

[求助] 在高效液相色谱做样时,怎么通过光谱判断样品中是否含有与标准物质相同的物质 已有3人参与

在高效液相色谱做样时,比如测苯甲酸的时候,要判断样品里是否含有苯甲酸,除了要比较样品和标液的保留时间,还要看光谱,我现在的疑问是光谱是怎么看呢?比如样品和苯甲酸标液都是在五分钟的时候出峰,那么看光谱是只比较五分钟处的峰的光谱的整体形状,整体形状完全一致则为同一种物质即样品中含有苯甲酸吗?还是只需要比较5min的这个峰的光谱图的最大吸收处的光谱形状呢?求高手解答啊~~~

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学术巨星

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感谢参与,应助指数 +1
看峰的整体的紫外吸收光谱,比如紫外光谱扫描范围是200-350nm,那么拿这段波长内的吸收光谱和标准品比较。

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2楼2016-01-02 17:08:11
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学术巨星

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【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 可可love92 at 2016-01-02 22:45:03
比如紫外光谱扫描范围是200—350nm,拿样品这段波长内的吸收光谱和标准品比较,样品和标准品在这段波长内的光谱必须完全相同两者才是同一种物质吗?还是样品和标准品在这段波长内的光谱大致相似不必完全相同即可判 ...

实际样品由于基体或干扰物的影响可能很难100%匹配,但主要峰形至少应该相同的。如果色谱软件允许,这可以借助软件中的匹配因子来判断样品与标样光谱的匹配程度。

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4楼2016-01-02 23:37:05
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学术巨星

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9楼: Originally posted by syauenergy at 2016-01-03 11:31:45
样品出现的峰是混合的,有办法使其分开吗?
...

改变分离条件,比如梯度洗脱、柱温、流速、pH等

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13楼2016-01-03 14:46:34
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可可love92

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 学术巨星 at 2016-01-02 17:08:11
看峰的整体的紫外吸收光谱,比如紫外光谱扫描范围是200-350nm,那么拿这段波长内的吸收光谱和标准品比较。

比如紫外光谱扫描范围是200—350nm,拿样品这段波长内的吸收光谱和标准品比较,样品和标准品在这段波长内的光谱必须完全相同两者才是同一种物质吗?还是样品和标准品在这段波长内的光谱大致相似不必完全相同即可判断两者是同一种物质?

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3楼2016-01-02 22:45:03
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siyi117

新虫 (著名写手)

/vip/我一直在不停地走,不停地走,到頭?韰s發現你始終是圓規的針尖,而我是筆尖,距離總是那麽遠……
5楼2016-01-03 00:02:20
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可可love92

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 学术巨星 at 2016-01-02 23:37:05
实际样品由于基体或干扰物的影响可能很难100%匹配,但主要峰形至少应该相同的。如果色谱软件允许,这可以借助软件中的匹配因子来判断样品与标样光谱的匹配程度。
...

基体和干扰物一般是那些东东啊?还有你说的主要峰形至少应该是相同的,那我们通过光谱判断的话应该怎么判断呢?主要峰形是指哪些峰?对这块不太明白

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6楼2016-01-03 10:22:36
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可可love92

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by siyi117 at 2016-01-03 00:02:20
特征吸收啊

能详细说下吗?对这块不太明白

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7楼2016-01-03 10:23:37
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学术巨星

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 可可love92 at 2016-01-03 10:22:36
基体和干扰物一般是那些东东啊?还有你说的主要峰形至少应该是相同的,那我们通过光谱判断的话应该怎么判断呢?主要峰形是指哪些峰?对这块不太明白
...

比如你的左手就是标准物质的紫外吸收光谱,主要峰形就是五个手指头,这就是特征吸收峰或者指纹图谱。如果样品的峰是一个鸡爪子形状,那就不是一个物质。

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8楼2016-01-03 11:05:53
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syauenergy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 学术巨星 at 2016-01-03 11:05:53
比如你的左手就是标准物质的紫外吸收光谱,主要峰形就是五个手指头,这就是特征吸收峰或者指纹图谱。如果样品的峰是一个鸡爪子形状,那就不是一个物质。
...

样品出现的峰是混合的,有办法使其分开吗?

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9楼2016-01-03 11:31:45
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破碎雨后

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

10楼2016-01-03 12:12:15
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