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mulezy

新虫 (初入文坛)

[交流] 新人求助分析图~~ 已有3人参与

marker后1 2 孔用的是同一种引物,为什么条带位置不一样? 并且4 5 6孔可能出现两个条带都是引物二聚体吗?如果不是二聚体,条带的位置跟我的目的基因位置也不符合。7 8 两孔看起来是引物二聚体,可是9为什么没有二聚体?并且条带位置跟我的目的基因位置是符合的! 很不解,请求回答~  每三个孔分别是阳性对照,样品,阴性对照。

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mulezy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-24 14:44:22
Marker都没有跑开,你的胶浓度时多大?目的基因的大小?
阴性对照也跑出条带,肯定是有污染。
排除污染的情况下,跑的条带还不对,就要换引物了。可能是引物特异性不行。你的引物退火温度是多少?PCR反应条件是怎 ...

退火60度  我想知道的是同一种引物可能位置不太一样么?  marker没有跑开估计跟我的电泳槽有关,有点接触不良,导致电阻变大,有这种可能么?
7楼2015-12-24 20:26:48
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SorryJ

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
怎么感觉你阴性也跑出条带了?

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-20 23:58:57
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mulezy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by SorryJ at 2015-12-20 23:58:57
怎么感觉你阴性也跑出条带了?

我也感觉有条带,但是估计是引物特异性不好。。我纠结的是前面两个条带 位置不一样。。。
3楼2015-12-23 15:59:29
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SorryJ

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by mulezy at 2015-12-23 15:59:29
我也感觉有条带,但是估计是引物特异性不好。。我纠结的是前面两个条带 位置不一样。。。...

如果阴性有条带说明你东西污染了呀。重新做一次看看,PCR就是这么恶心人。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-12-23 16:27:08
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