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mulezy

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[交流] 新人求助分析图~~ 已有3人参与

marker后1 2 孔用的是同一种引物，为什么条带位置不一样？并且4 5 6孔可能出现两个条带都是引物二聚体吗？如果不是二聚体，条带的位置跟我的目的基因位置也不符合。7 8 两孔看起来是引物二聚体，可是9为什么没有二聚体？并且条带位置跟我的目的基因位置是符合的！很不解，请求回答~ 每三个孔分别是阳性对照，样品，阴性对照。

IMG_2179.JPG

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1楼 2015-12-20 23:49:50

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mulezy

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引用回帖:

6楼: Originally posted by 足下客 at 2015-12-24 14:44:22
Marker都没有跑开，你的胶浓度时多大？目的基因的大小？
阴性对照也跑出条带，肯定是有污染。
排除污染的情况下，跑的条带还不对，就要换引物了。可能是引物特异性不行。你的引物退火温度是多少？PCR反应条件是怎 ...

退火60度我想知道的是同一种引物可能位置不太一样么？ marker没有跑开估计跟我的电泳槽有关，有点接触不良，导致电阻变大，有这种可能么？

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7楼2015-12-24 20:26:48

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SorryJ

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怎么感觉你阴性也跑出条带了？

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2楼2015-12-20 23:58:57

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mulezy

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引用回帖:

2楼: Originally posted by SorryJ at 2015-12-20 23:58:57
怎么感觉你阴性也跑出条带了？

我也感觉有条带，但是估计是引物特异性不好。。我纠结的是前面两个条带位置不一样。。。

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3楼2015-12-23 15:59:29

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SorryJ

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引用回帖:

3楼: Originally posted by mulezy at 2015-12-23 15:59:29
我也感觉有条带，但是估计是引物特异性不好。。我纠结的是前面两个条带位置不一样。。。...

如果阴性有条带说明你东西污染了呀。重新做一次看看，PCR就是这么恶心人。

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4楼2015-12-23 16:27:08

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