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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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gnot_nail

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我个人的经验设计引物tm一般是在60度左右(57-62看实际情况),同时两条引物tm相差不超过1度。PCR时先55度看有没有条带 效果如何,然后根据需要提高到60度,不过我一般都是直接60度pcr。当然要是没有什么经验的话 直接温度梯度。。。不过你设计的Tm50度个人觉得太低了。。而且误差了4度。
21楼2015-12-21 18:13:39
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瘸腿猎豹

铜虫 (初入文坛)

你的退火温度有点低,这个温度是要在网站上算出来的
时间可以改变一切!
22楼2015-12-22 21:37:37
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tuzkileon

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

两种选择,首先可以把引物的序列输入到oligo7软件,让它通过产物给你计算退火温度,当然这个工作用primer6也可以做
其次就是做个梯度,自己摸索
23楼2015-12-22 21:38:57
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KI2018

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

24楼2018-06-05 12:59:57
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