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董朋

木虫 (小有名气)

我有一条是52℃,一条57℃,用55℃p没有任何问题,条带非常清晰!

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我在种植maize,来年收货妹子!
11楼2015-12-20 10:26:34
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梦幻小豚豚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我的梯度虽然才47,但是我却是52才跑出来的。。。所以和其他建议一样,做梯度pcr
12楼2015-12-20 10:47:20
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石NANONG

新虫 (小有名气)

都是理论值,适合你的需要自己跑胶做。
如果你们的PCR仪是伯乐的有专门设置浓度剃度的程序。如果是life的自己设定47 51摄氏度,跑胶看条带。

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13楼2015-12-20 11:02:52
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z631535213

木虫 (正式写手)

我42度的都P过。做个梯度PCR就可以了

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14楼2015-12-20 13:03:33
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yvonne9044

新虫 (正式写手)

个人觉得45太低了,梯度是正解

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15楼2015-12-20 18:06:39
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
正反向的TM值平均值-5,作为预实验的退火温度,看扩增结果再适当增减温度
16楼2015-12-21 08:47:10
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xuexingxiang

银虫 (小有名气)

合适的温度也许在54度以上,做梯度跑胶验证最好了,跟你设计的有时候相差很多

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知行合一,进入新的境界
17楼2015-12-21 08:50:21
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吗子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以多尝试几个温度,建议 50℃ 。温度越高,特异性越强
深秋
18楼2015-12-21 11:05:40
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
做个温度梯度看一下。50度时太低了,以后设计引物最好不要这么低
19楼2015-12-21 12:49:44
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yq生活精灵

新虫 (正式写手)

20楼2015-12-21 15:52:52
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