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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR退火温度设定多少合适
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董朋

木虫 (小有名气)
我有一条是52℃，一条57℃，用55℃p没有任何问题，条带非常清晰！

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我在种植maize，来年收货妹子！
11楼2015-12-20 10:26:34
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梦幻小豚豚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我的梯度虽然才47，但是我却是52才跑出来的。。。所以和其他建议一样，做梯度pcr
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12楼2015-12-20 10:47:20
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石NANONG

新虫 (小有名气)
都是理论值，适合你的需要自己跑胶做。
如果你们的PCR仪是伯乐的有专门设置浓度剃度的程序。如果是life的自己设定47 51摄氏度，跑胶看条带。

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13楼2015-12-20 11:02:52
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z631535213

木虫 (正式写手)
我42度的都P过。做个梯度PCR就可以了

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14楼2015-12-20 13:03:33
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yvonne9044

新虫 (正式写手)
个人觉得45太低了，梯度是正解

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15楼2015-12-20 18:06:39
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
正反向的TM值平均值-5，作为预实验的退火温度，看扩增结果再适当增减温度
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16楼2015-12-21 08:47:10
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xuexingxiang

银虫 (小有名气)
合适的温度也许在54度以上，做梯度跑胶验证最好了，跟你设计的有时候相差很多

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知行合一，进入新的境界
17楼2015-12-21 08:50:21
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吗子

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以多尝试几个温度，建议 50℃ 。温度越高，特异性越强
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深秋
18楼2015-12-21 11:05:40
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足下客

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做个温度梯度看一下。50度时太低了，以后设计引物最好不要这么低
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19楼2015-12-21 12:49:44
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yq生活精灵

新虫 (正式写手)
45到50做个梯度pcr

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20楼2015-12-21 15:52:52
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