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areslhr

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
43楼: Originally posted by 履霜 at 2015-12-23 12:29:14
easy,退火温度时间太短,扩增不完全导致涂抹带,怀疑污染的话,换水。

这样的话阴性对照也会出现拖带嘛?
Stop and stare
51楼2015-12-23 21:25:07
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areslhr

铁虫 (小有名气)

如果有老师愿意为我解决这个问题,一定以十足感激之情相待,人在澳洲,有什么资料查不到的我都可以代为帮忙,分享昆士兰大学的各种资源。

我自己的分析如excel所示

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  • 附件 1 : 7号以来实验问题分析.xlsx
  • 2015-12-23 21:27:17, 10 K
Stop and stare
52楼2015-12-23 21:29:44
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
53楼2015-12-23 21:49:29
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履霜

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
51楼: Originally posted by areslhr at 2015-12-23 21:25:07
这样的话阴性对照也会出现拖带嘛?...

水要DEPC处理,管子也是DEPC处理,在hood里面加样,加样之前照紫外。稀释引物的水也要DEPC的,Tips也是DEPC处理的。
I measured love by the extent of my jealousy...
54楼2015-12-24 00:57:41
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履霜

木虫 (正式写手)

引用回帖:
51楼: Originally posted by areslhr at 2015-12-23 21:25:07
这样的话阴性对照也会出现拖带嘛?...

换水
I measured love by the extent of my jealousy...
55楼2015-12-24 00:57:57
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a610291425

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看到你的总结感觉会对我有帮助,我也遇到过一次类似的问题,我排除实验做了十几次,能排查的都排查了,可实验问题就是解决不了,也认真总结过没有哪里出错,最后一位师姐让换个人试试,他说有时候实验就是那么神奇!结果换个人问题真就解决了,最终问题出在哪?到现在我也不明白,不妨你也试试!仅供参考
56楼2015-12-24 11:44:17
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areslhr

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
46楼: Originally posted by stephenreal at 2015-12-23 17:23:47
客气了。
...

您好老师!

后来按您的说的做法。

发现只要是水、此对引物、premix 共存的情况下,就会出现拖带。 但是单独测试每一项都没发现问题, 确实很奇怪。

好在后来重新提取模板,虽然拖带依旧出现,但是目标条带非常亮,提纯之后拖带消失。
Stop and stare
57楼2016-01-13 19:47:46
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