24小时热门版块排行榜    

查看: 14069  |  回复: 23

angiexx

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教电泳跑胶电压和时间 已有1人参与

大家好,我刚接触分子生物学,提取的DNA片段应该在15000bp以上,电泳用的宝生物的15000bp marker,按理说有7条条带,为何我跑出来只有3条呢?跑胶电压140V,浓度1%(0.25g琼脂糖,25mL 0.5倍TBE),可能加热过程有挥发,浓度实际比1%高,跑胶时间35min,前面蓝色的条带已经跑到了胶中间。
我问过生物专业的同学大多电压不超过110,但我之前一直用1%的胶,180V,跑20min,如果目的片段只有100~500bp,条件180V,20min,胶浓度1%可以吗?100bp和150bp的片段,1%的胶180V 20min可以区分开吗?谢谢大家!

请教电泳跑胶电压和时间
20151217DNAtiqu.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hmz2007

银虫 (正式写手)

你按照marker说明书里面的条件跑,才能出来相似的结果,不要太盲目。此外一百多的,如果各条带差异小,就要用4%左右的,跑的45min才能好看

发自小木虫Android客户端
4楼2015-12-17 23:23:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

雪狼X

新虫 (初入文坛)

我们做的实验是150V电压,跑20min。

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-17 18:21:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

angiexx

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 雪狼X at 2015-12-17 18:21:47
我们做的实验是150V电压,跑20min。

不管多长bp,都是150V  20min吗?胶是1%的吗?

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-17 23:16:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmz2007

银虫 (正式写手)

多看分子克隆书,跑胶是基础,有大学问

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-17 23:24:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenllili

铜虫 (正式写手)

样品提取的不错,上样量多了,只是看提取的结果,marker点4ul,就足够了,

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-18 00:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暮色西荷

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
angiexx: 金币+6, 有帮助 2015-12-18 12:37:40
150V,100V,120V都跑过,一般发文章的图低电压跑的漂亮;平常做实验就大电压跑的快,不耽误事

发自小木虫Android客户端
7楼2015-12-18 00:16:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenllili

铜虫 (正式写手)

胶充分溶解,倒板后静置30-60分钟分钟,室温低的话静置30分钟就可以用了,室温高的话就延长时间,时间过短凝固不充分,时间过长胶容易干。如果超过1小时不用,凝固后可在表面倒些电泳液,保持胶的湿润。

发自小木虫Android客户端
8楼2015-12-18 00:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ld梁冬

铜虫 (小有名气)

9楼2015-12-18 07:24:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xzw1991

金虫 (小有名气)

点样有点多,减少样品的点样量,低电压多跑一段时间试试。

发自小木虫Android客户端
10楼2015-12-18 10:38:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 angiexx 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 oepdf5z972 2026-06-20 3/150 2026-06-21 21:01 by zo4669e5n4
[基金申请] E0414, 我的本子有没有希望? +7 布布和一二 2026-06-17 9/450 2026-06-21 19:29 by 布布和一二
[考研] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 19:18 by q1p9ixelzp
[教师之家] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 18:58 by q1p9ixelzp
[公派出国] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 18:00 by q1p9ixelzp
[考研] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 4/200 2026-06-21 17:45 by q1p9ixelzp
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 9skg9htng1 2026-06-20 3/150 2026-06-21 17:37 by q1p9ixelzp
[公派出国] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 4/200 2026-06-21 17:25 by ky8v3skvft
[考博] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 5/250 2026-06-21 17:20 by ky8v3skvft
[博后之家] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 6/300 2026-06-21 17:05 by ky8v3skvft
[公派出国] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 5/250 2026-06-21 17:00 by ky8v3skvft
[教师之家] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +5 vlfdw50o0u 2026-06-20 7/350 2026-06-21 16:57 by ky8v3skvft
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +3 vlfdw50o0u 2026-06-20 5/250 2026-06-21 16:45 by ky8v3skvft
[教师之家] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 7/350 2026-06-21 16:40 by ky8v3skvft
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章,我:8O5.51.O.54,科目齐全,可+急 +4 vlfdw50o0u 2026-06-20 9/450 2026-06-21 16:37 by ky8v3skvft
[基金申请] 青A35岁以下通知答辩了吗 +3 暨阳一只柴 2026-06-17 3/150 2026-06-21 09:39 by kudofaye
[考博] 【全奖博士/科研助理/博后招生】新加坡南洋理工大学机械与航空航天学院 +3 robohaha 2026-06-15 4/200 2026-06-21 00:36 by lanbing1
[基金申请] 希望面上有个好结果 +7 碧水00 2026-06-16 7/350 2026-06-18 12:18 by wuke100666
[论文投稿] 三区计算机方向期刊推荐 +5 1457340941 2026-06-15 5/250 2026-06-17 13:16 by 会议编辑
[论文投稿] sci论文二审求助 +5 潘倍倍 2026-06-15 5/250 2026-06-16 10:15 by xs74101122
信息提示
请填处理意见