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请教电泳跑胶电压和时间 已有1人参与
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大家好，我刚接触分子生物学，提取的DNA片段应该在15000bp以上，电泳用的宝生物的15000bp marker，按理说有7条条带，为何我跑出来只有3条呢？跑胶电压140V，浓度1%（0.25g琼脂糖，25mL 0.5倍TBE），可能加热过程有挥发，浓度实际比1%高，跑胶时间35min，前面蓝色的条带已经跑到了胶中间。 我问过生物专业的同学大多电压不超过110,但我之前一直用1%的胶，180V，跑20min，如果目的片段只有100~500bp，条件180V,20min，胶浓度1%可以吗？100bp和150bp的片段，1%的胶180V 20min可以区分开吗？谢谢大家！   20151217DNAtiqu.jpg |
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 Molecular Biology |
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你按照marker说明书里面的条件跑，才能出来相似的结果，不要太盲目。此外一百多的，如果各条带差异小，就要用4%左右的，跑的45min才能好看 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-12-17 23:23:47
2楼2015-12-17 18:21:47
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5楼2015-12-17 23:24:47
chenllili
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6楼2015-12-18 00:12:47
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150V,100V,120V都跑过，一般发文章的图低电压跑的漂亮；平常做实验就大电压跑的快，不耽误事 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-12-18 00:16:57
chenllili
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胶充分溶解，倒板后静置30-60分钟分钟，室温低的话静置30分钟就可以用了，室温高的话就延长时间，时间过短凝固不充分，时间过长胶容易干。如果超过1小时不用，凝固后可在表面倒些电泳液，保持胶的湿润。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-12-18 00:20:12
9楼2015-12-18 07:24:18
xzw1991
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10楼2015-12-18 10:38:23