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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教电泳跑胶电压和时间
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angiexx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by xzw1991 at 2015-12-18 10:38:23
点样有点多，减少样品的点样量，低电压多跑一段时间试试。

那跑多长时间呢？前面蓝色的条带跑到胶中间就代表跑胶可以结束了吗？

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11楼2015-12-18 10:42:48
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angiexx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2015-12-18 00:16:57
150V,100V,120V都跑过，一般发文章的图低电压跑的漂亮；平常做实验就大电压跑的快，不耽误事

嗯嗯

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12楼2015-12-18 10:43:21
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angiexx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hmz2007 at 2015-12-17 23:23:47
你按照marker说明书里面的条件跑，才能出来相似的结果，不要太盲目。此外一百多的，如果各条带差异小，就要用4%左右的，跑的45min才能好看

谢谢，可是为什么我的说明书里没有跑胶条件？？？？
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13楼2015-12-18 12:44:44
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angiexx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ld梁冬 at 2015-12-18 07:24:18
用1%的胶，220V,300mA,66W跑

不是设置了电压，电流和功率自己就定了吗？也可以自己设置吗？刚刚开始接触这方面，问的比较水……那跑多长时间呢？是看胶前面的蓝色条带跑到胶中间就可以吗？
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14楼2015-12-18 12:46:48
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keith_fly

新虫 (初入文坛)
可以分开的
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宁静致远
15楼2015-12-18 13:08:39
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)
其实电压120v也是可以的，跑30——40分钟。TBE溶液是：50倍TBE，加1000ml去离子水配制的。如果是1/2胶，用0.4g琼脂糖加入40mlTBE缓冲液，后加入1.4ulGenegreen，以此类推1/4和整版胶的配方。至于DNA的目的片段我还从未关心过....如果检测的OD值和浓度没问题，再上琼脂糖跑胶，只要有明亮的条带，就可以用的。从图上可以看出你的DNA条带很亮，浓度很浓。可以用。
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16楼2015-12-18 14:15:38
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angiexx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-12-18 14:15:38
其实电压120v也是可以的，跑30——40分钟。TBE溶液是：50倍TBE，加1000ml去离子水配制的。如果是1/2胶，用0.4g琼脂糖加入40mlTBE缓冲液，后加入1.4ulGenegreen，以此类推1/4和整版胶的配方。至于DNA的目的片段我还从 ...

我们用的0.5倍的TBE，那倒是，可以用就可以～

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17楼2015-12-18 14:37:51
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SorryJ

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by angiexx at 2015-12-17 23:16:29
不管多长bp，都是150V  20min吗？胶是1%的吗？
...

怎么可能？你片段越小，跑的越快。

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18楼2015-12-18 14:56:54
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SorryJ

银虫 (小有名气)
电压太高了，胶会变软的，而且跑出来的条带飘的很，不好看。跑胶简单，但也容易犯错，多试几次，

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19楼2015-12-18 15:00:13
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Huobol

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 洛可可薇薇 at 2015-12-18 14:15:38
其实电压120v也是可以的，跑30——40分钟。TBE溶液是：50倍TBE，加1000ml去离子水配制的。如果是1/2胶，用0.4g琼脂糖加入40mlTBE缓冲液，后加入1.4ulGenegreen，以此类推1/4和整版胶的配方。至于DNA的目的片段我还从 ...

50倍TBE？不是TAE吗。
TBE溶解度小，配50倍的母液这么强啊！
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让羽毛再飞一会儿
20楼2015-12-18 15:41:33
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