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真菌菌丝提取及电泳图求解释! 已有1人参与
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用CTAB提取法提取真菌DNA,但是抽提DNA过程中只用了氯仿/异戊醇(24:1),没有使用Tris饱和酚抽提。在1%琼脂糖凝胶电泳中检测有无条带,如下图所示,请教各位大神:这是什么原因? 急需,感激不尽。。。。。。 20151216DNA(SHEN).jpg |
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The 4th step would be the problem. The order is different from my CTAB protocol, which is "Add 0.5 volume 5M NaCl and mix properly. Then add 2/3 volume ice-cold isopropanol and leave at least 20minutes (up to overnight) at -20 degrees Celsiu." It must be pointed out that once DNA and polysaccharides co-precipitate together, it becomes much more difficult to separate them than prior to precipitation. By adding 0.5 volum 5M NaCl to the CI-extracted aqueous solution just prior to precipitation by isopropanol, it is effectivly separate the DNA from polysaccarides. In my opinion, this step is the key to CTAB protocol. |
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本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 3%_CTAB_DNA_Extraction_Protocol.pdf
2016-01-08 16:09:12, 50.16 K
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6楼2016-01-08 16:09:13
2楼2015-12-17 15:51:36
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alice keer