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FITC标记的二抗和HRP标记的二抗有什么区别？ 已有3人参与
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| FITC标记的二抗和HRP标记的二抗有什么区别？ |
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【答案】应助回帖
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用显微镜干啥？那么大一张膜，你一个点一个点去照相，后面怎么分析？fitc是荧光标记，你在成像仪里用紫外激发就可以拍照了，但好像影响因素很多，做起来比较复杂。一般这类荧光是做的多重western（只听说过，没见哪个实验室做过）。HRP是化学自发光的，比较常用。 发自小木虫IOS客户端 |
11楼2015-12-19 10:41:07
2楼2015-12-15 20:59:09
3楼2015-12-15 20:59:22
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
| FITC为荧光基团，,最大吸收光波长为490～495nm,最大发射光波长为520～530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。如果FITC标记的二抗和一抗结合上了，去除没有结合一抗的FITC标记的二抗，就可以直接进行荧光读数了，产生的荧光信号就代表一抗二抗结合在一起的量。HRP为辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP），其本身并不产生信号，需要另外加入该酶的底物如TMB后，催化底物产生有信号的产物，多一步加底物显色的过程。FITC读数需要一起能够读荧光（fluorescence ）的功能，而用HRP显色需要另外购置底物，底物不一样读数的方式也不一样，TMB读吸光度absorbance，另外的底物Amplex Red也能够读荧光fluorescence或者其他底物读化学发光Luminescence |
4楼2015-12-15 21:44:07