应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » FITC标记的二抗和HRP标记的二抗有什么区别？
121/2返回列表12下一页
查看: 8203  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] FITC标记的二抗和HRP标记的二抗有什么区别？ 已有3人参与

FITC标记的二抗和HRP标记的二抗有什么区别？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-12-15 16:51:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yyy0305

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
FITC为荧光基团，,最大吸收光波长为490～495nm,最大发射光波长为520～530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。如果FITC标记的二抗和一抗结合上了，去除没有结合一抗的FITC标记的二抗，就可以直接进行荧光读数了，产生的荧光信号就代表一抗二抗结合在一起的量。HRP为辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP），其本身并不产生信号，需要另外加入该酶的底物如TMB后，催化底物产生有信号的产物，多一步加底物显色的过程。FITC读数需要一起能够读荧光（fluorescence ）的功能，而用HRP显色需要另外购置底物，底物不一样读数的方式也不一样，TMB读吸光度absorbance，另外的底物Amplex Red也能够读荧光fluorescence或者其他底物读化学发光Luminescence
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2015-12-15 21:44:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mutant

铁虫 (小有名气)
FITC带的荧光标记，只有借助荧光显微镜才能观察，而HRP带的是辣根过氧根集团，需要显色剂DAP才能显色，一般在普通光镜下就可以观察
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-12-15 21:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘，必有回响

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2015-12-16 10:53:56
那我用FITC做western ,是不是加带FITC的二抗孵育后马上在荧光显微镜下观察？
...

具体我不清楚，但是之前量子高科的一位客户跟我反应过这个问题，你可以在你实验过程中也观察一下。
赞一下(1人) 回复此楼
to be or not to be
10楼2015-12-17 09:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
有金币

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
2楼2015-12-15 20:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2015-12-15 20:59:09
有金币

请大侠告知

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
3楼2015-12-15 20:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yyy0305 at 2015-12-15 21:44:07
FITC为荧光基团，,最大吸收光波长为490～495nm,最大发射光波长为520～530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。如果FITC标记的二抗和一抗结合上了，去除没有结合一抗的FITC标记的二抗，就可以直接进行荧光读数了，产生的荧光信 ...

谢谢

[ 发自小木虫客户端 ]
回复此楼
6楼2015-12-15 22:14:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mutant at 2015-12-15 21:44:28
FITC带的荧光标记，只有借助荧光显微镜才能观察，而HRP带的是辣根过氧根集团，需要显色剂DAP才能显色，一般在普通光镜下就可以观察

啊，知道了，功能是一样的，只是需要借助的外物不同，开观察荧光

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2015-12-15 22:15:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjin1981

金虫 (正式写手)

念念不忘，必有回响

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
FITC的半衰期短，容易在实验过程中荧光消失
赞一下 回复此楼
to be or not to be
8楼2015-12-16 09:11:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wangjin1981 at 2015-12-16 09:11:50
FITC的半衰期短，容易在实验过程中荧光消失

那我用FITC做western ,是不是加带FITC的二抗孵育后马上在荧光显微镜下观察？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-12-16 10:53:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 杨仔儿 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +11 羊腰板 2026-08-21 11/550 2026-08-22 22:03 by lsbin3733
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 3/150 2026-08-22 22:03 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-22 21:54 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭