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fusheng011

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何根据荧光显微镜选择荧光标记的二抗?? 已有1人参与

大家好 最近要做免疫荧光 可是以前没有做过 有些问题需要请教:

通过查资料 知道荧光标记的抗体有多种 如FITC标记的 Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555标记山羊抗小鼠IgG(H+L)等等多种抗体 但是我看到有的荧光标记的抗体说明书上说明不同的荧光基团有不同的吸收峰(Absorption Peak)和发射峰(Emission Peak)。
比如:
FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)   Absorption Peak(nm):492  Emission Peak(nm):520

Alexa Fluor 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)  Absorption Peak(nm):495  Emission Peak(nm):519

另外还有很多不同的荧光基团他们的吸收峰和发射峰都各不相同,颜色也各不相同,我要请教的问题是我不知道我随便选择一个荧光基团标记的抗体在我的显微镜上都能看到应该看到的荧光吗?是不是需要根据我的荧光显微镜的参数范围来选择相应荧光基团标记的抗体呢?如果是该怎么选择呢?我不是很懂,期望得到指导!!谢谢!
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-12 15:23:39
最好荧光的波长和显微镜一致,主要还是看显微镜的配置性能。
2楼2010-07-12 15:17:40
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