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[求助]
想要透析纯化一个蛋白，求有经验的大神来教教小弟 已有3人参与
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目前大概200ml经过超声破碎细胞获得的粗酶液，看到文献中有用透析的方法进行纯化蛋白的。但是从来没有做过，实验室师兄师姐也没做过类似工作。求哪位大神有比较丰富详细的操作经验来指导下~~~ |
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3楼2015-12-15 16:08:16
hc-material
专家顾问 (职业作家)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
o隐形人o: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-27 20:22:51
感谢参与，应助指数 +1
o隐形人o: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-03-27 20:22:51
| 透析法纯化，效果不是很好，纯度也不好，比如你的蛋白50kd的，你选用10kd的膜截留，大于10kd的蛋白就在透析膜里面，小于的杂蛋白就除去了，或者你的蛋白2kd，你就选用10kd的透析膜，目标就在透析液中，大于10kd的杂蛋白就在透析袋中。这个效果不好，还不如分级盐析啊，就是溶液加不同量的硫酸铵，然后，每个浓度收集沉淀，溶解，看你的目标在那个里面。纯度也不高，要高纯度的，还是层析比较好，比如疏水的，离子交换的等等，祝顺利。 |
2楼2015-12-14 15:02:38
4楼2015-12-20 12:34:16
5楼2016-03-27 20:24:15