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奇怪人生123

银虫 (小有名气)

[求助] 150 bp的DNA片段,电泳时出现笑脸 求电泳高手相助!!! 已有2人参与

实验中扩增了150 bp的条带,但是在电泳时条带总会出现弧状的黑色阴影,扩增条带恰巧就位于其中,如图。
其他信息:电泳缓冲液是0.5X TBE,2%的琼脂糖凝胶,用过TAKARA的6x Loading Buffer也用过Invitrogen的10X Loading Buffer(效果一样),其他大的片段(1kb以上的条带)从未出现过这种状况。
请问,这个黑色阴影究竟是什么?为何会把我的条带全部吸进去呢?

150 bp的DNA片段,电泳时出现笑脸   求电泳高手相助!!!
123.png
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liumengyun

新虫 (初入文坛)

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奇怪人生123: 金币+4, 有帮助 2015-12-14 11:36:41
出现笑脸一般是因为分离胶凝固的不好,我前两天做实验的时候也出现过这种情况!

发自小木虫Android客户端
2楼2015-12-14 10:18:03
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lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
奇怪人生123: 金币+14, ★★★很有帮助 2015-12-14 11:36:54
奇怪人生123: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2015-12-14 11:37:20
黑色的是loading buffer中的溴酚蓝,在2%琼脂糖凝胶中溴酚蓝迁移率与150bp线性DNA大致相同,你这个产物片段正好和溴酚蓝位置重合了
另外,6X buffer一般是DNA上样时用的,10X buffer是RNA上样时用的
最后,出现笑脸与胶和缓冲液有关,胶没凝好、缓冲液使用次数过多会出现这个情况
我们用多一点点的辛苦,来交换多一点点的幸福。
3楼2015-12-14 10:53:31
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