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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 150 bp的DNA片段，电泳时出现笑脸 求电泳高手相助！！！
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奇怪人生123

银虫 (小有名气)

[求助] 150 bp的DNA片段，电泳时出现笑脸 求电泳高手相助！！！ 已有2人参与

实验中扩增了150 bp的条带，但是在电泳时条带总会出现弧状的黑色阴影，扩增条带恰巧就位于其中，如图。
其他信息：电泳缓冲液是0.5X TBE，2%的琼脂糖凝胶，用过TAKARA的6x Loading Buffer也用过Invitrogen的10X Loading Buffer（效果一样），其他大的片段（1kb以上的条带）从未出现过这种状况。
请问，这个黑色阴影究竟是什么？为何会把我的条带全部吸进去呢？

150 bp的DNA片段，电泳时出现笑脸   求电泳高手相助！！！
123.png
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1楼 2015-12-14 10:02:18
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liumengyun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奇怪人生123: 金币+4, ★有帮助 2015-12-14 11:36:41
出现笑脸一般是因为分离胶凝固的不好，我前两天做实验的时候也出现过这种情况！

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2楼2015-12-14 10:18:03
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lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
奇怪人生123: 金币+14, ★★★很有帮助 2015-12-14 11:36:54
奇怪人生123: 金币+2, ★★★★★最佳答案 2015-12-14 11:37:20
黑色的是loading buffer中的溴酚蓝，在2%琼脂糖凝胶中溴酚蓝迁移率与150bp线性DNA大致相同，你这个产物片段正好和溴酚蓝位置重合了
另外，6X buffer一般是DNA上样时用的，10X buffer是RNA上样时用的
最后，出现笑脸与胶和缓冲液有关，胶没凝好、缓冲液使用次数过多会出现这个情况
赞一下 回复此楼
我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
3楼2015-12-14 10:53:31
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