24小时热门版块排行榜    

查看: 1003  |  回复: 12
当前主题已经存档。

xtmgah31

银虫 (小有名气)

[交流] PCR条带弱

今天做了一个PCR,扩增微生物的16S rDNA的V3区,
循环数30,20微升的体系,取3微升跑电泳检测,结果条带不是很亮,请大家帮忙分析下原因。

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-15 at 14:51 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

3微升的上样量似乎少了点哦,很亮不太可能的。不知道楼主要多亮哦。要拍照的话那就多上样。
活着就要让人感受到你的存在。
2楼2008-09-22 22:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

running8853

金虫 (正式写手)

3微的产物太少了
3楼2008-09-24 08:18:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老鼠大王

条带不太亮的原因很多。模板量,引物本身,以及扩增体系中Tap酶的含量等,找出可能原因。多做几次。呵呵看看 结果如何!我们实验室一般3-4,结果都还蛮好的
4楼2008-09-24 08:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaolianwen

铜虫 (正式写手)

如果你的maker加的多的话你的条带也会受影响,因为看胶的时候焦距是以maker最亮的带为标准的!
如果没有非特异性条带,也可以增加循环数!

[ Last edited by qiaolianwen on 2008-9-24 at 10:29 ]
结束了,哪些没有自我的日子;新生活,开始了!
5楼2008-09-24 10:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoguo1738

银虫 (小有名气)

上样量少点
6楼2008-09-24 11:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangsf8978

是不是EB用的时间太久了
7楼2008-09-25 09:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

不亮只要大小正确,做下游的载体构建等工作都是可以的
建议你可以多p几管,在回收的时候回收到一个管里,这样你的量就大了
pcr只要大小正确,不要耽误时间,继续往下做
8楼2008-09-25 16:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuli1675


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可有时候不亮很难连上载体,转化也很易出问题
9楼2009-08-12 15:24:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apfel

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那就是你的PCR产物量太少了,产量多的话3ul足够了,检查一下PCR体系,反应程序,优化一下。
10楼2009-08-26 17:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xtmgah31 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂323材料与化工 +3 1124361 2026-03-24 3/150 2026-03-24 20:24 by peike
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +5 谷雨上岸 2026-03-23 6/300 2026-03-24 16:32 by laoshidan
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 考研化学308分求调剂 +7 你好明天你好 2026-03-23 8/400 2026-03-23 18:39 by macy2011
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 4/200 2026-03-22 10:25 by QGZDSYS
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见