24小时热门版块排行榜    

查看: 1001  |  回复: 12
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xtmgah31

银虫 (小有名气)

[交流] PCR条带弱

今天做了一个PCR,扩增微生物的16S rDNA的V3区,
循环数30,20微升的体系,取3微升跑电泳检测,结果条带不是很亮,请大家帮忙分析下原因。

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-15 at 14:51 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

不亮只要大小正确,做下游的载体构建等工作都是可以的
建议你可以多p几管,在回收的时候回收到一个管里,这样你的量就大了
pcr只要大小正确,不要耽误时间,继续往下做
8楼2008-09-25 16:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

3微升的上样量似乎少了点哦,很亮不太可能的。不知道楼主要多亮哦。要拍照的话那就多上样。
活着就要让人感受到你的存在。
2楼2008-09-22 22:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老鼠大王

条带不太亮的原因很多。模板量,引物本身,以及扩增体系中Tap酶的含量等,找出可能原因。多做几次。呵呵看看 结果如何!我们实验室一般3-4,结果都还蛮好的
4楼2008-09-24 08:49:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaolianwen

铜虫 (正式写手)

如果你的maker加的多的话你的条带也会受影响,因为看胶的时候焦距是以maker最亮的带为标准的!
如果没有非特异性条带,也可以增加循环数!

[ Last edited by qiaolianwen on 2008-9-24 at 10:29 ]
结束了,哪些没有自我的日子;新生活,开始了!
5楼2008-09-24 10:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕,求调剂 6+3 糖葫芦888ll 2026-03-22 7/350 2026-03-24 17:11 by hello七七
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 7/350 2026-03-24 15:24 by cuifj
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +3 哈哈157349 2026-03-21 3/150 2026-03-24 14:11 by zhyzzh
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 303求调剂 +4 元夕元 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:00 by macy2011
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 307求调剂 +11 冷笙123 2026-03-17 11/550 2026-03-22 20:16 by edmund7
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见