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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位大神，为什么pcr产物跑不出胶？且胶的亮度也不行。
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smile-20

金虫 (正式写手)

[求助] 各位大神，为什么pcr产物跑不出胶？且胶的亮度也不行。 已有3人参与

PCR体系：模板1微升（两微升也加过）引物各0.5微升 pcr master mix 12.5微升 ddh2O 10.5微升
pcr程序：95摄氏度 2分钟
         95摄氏度 1分钟
         51摄氏度 1.5分钟
         72摄氏度 1分钟   X34
                72摄氏度 延伸五分钟

肿么办，困扰了好久了，找不出原因？拜托了、、、、、
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everythingispossible
1楼 2015-12-10 10:55:56
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smile-20

金虫 (正式写手)
用的是核酸染料、
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everythingispossible
2楼2015-12-10 10:58:30
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
能把你这问题回答出来的也真是神了
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3楼2015-12-10 11:02:35
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smile-20

金虫 (正式写手)
图片传不上去啊
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everythingispossible
4楼2015-12-10 11:06:30
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smile-20

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-12-10 11:02:35
能把你这问题回答出来的也真是神了

图片传附件传不上去，试了三次了
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everythingispossible
5楼2015-12-10 11:07:45
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smile-20

金虫 (正式写手)
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everythingispossible
6楼2015-12-10 11:18:32
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smile-20

金虫 (正式写手)
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everythingispossible
7楼2015-12-10 11:19:57
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hcf321283

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有点东西啊，但是二聚体蛮亮的，建议摸索下条件再扩增···
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8楼2015-12-10 15:08:29
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liyu6655

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
9楼2015-12-10 16:21:02
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lsl635600374

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物浓度是多少？下面这个引物二聚体很亮
有条带，建议再做个温度梯度
这个pcr程序怎么来的，变性和退火时间太长了，整个下来估计三个小时了
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我们用多一点点的辛苦，来交换多一点点的幸福。
10楼2015-12-10 18:10:09
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