24小时热门版块排行榜    

查看: 3210  |  回复: 17

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

[求助] 求助各位虫友关于同一对引物对DNA及cDNA的扩增问题 已有4人参与

我用同一对引物扩增DNA和cDNA中某个基因的中间序列,最后发现出来的条带一样长,是不是就说明二者的序列一样呢,我能不能用DNA的扩增产物测序代替cDNA呢,望各位虫友不吝赐教,谢谢。
回复此楼
人必自助尔后天助之
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
cDNA是DNA转录成mRNA之后,逆转录得到的,两者有相同点也有不同。
如果原核,应该是一样的。
真核由于DNA中含有外显子和内含子,可能会造成DNA和cDNA的差别。具体是cDNA中没有内含子序列而DNA中有。
扩增产物条带如果比较小,那么容易区分大小,条带大小相同说明其中可能不含有内含子序列。
但如果扩增产物较大,其中内含子有很小的话,仅看条带是不太能分得出是否真的大小一样的。
7楼2015-12-10 09:00:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

各位虫友这会儿还在吃大餐啊
人必自助尔后天助之
2楼2015-12-09 19:19:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

来人赐教。。。。急求。。。。
人必自助尔后天助之
3楼2015-12-09 21:33:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

人必自助尔后天助之
4楼2015-12-10 00:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xufengnbu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个都回收,连到t载体,送去测序看看结果。

发自小木虫IOS客户端
why is the way to success
5楼2015-12-10 00:10:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1202ld

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不一定,我们也有某基因的cds区设计引物,dna   cdna模版跑出来条带也是一样的,但这是因为在cds编码区设计的引物,如果要送测序,建议还是用cdna的,保证没有内含子。

发自小木虫Android客户端
6楼2015-12-10 00:18:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xufengnbu at 2015-12-10 00:10:09
两个都回收,连到t载体,送去测序看看结果。

样比较多,回收了几个之后感觉时间不够打算直接用pcr反应产物送去测序

发自小木虫Android客户端
人必自助尔后天助之
8楼2015-12-10 09:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1202ld at 2015-12-10 00:18:23
不一定,我们也有某基因的cds区设计引物,dna   cdna模版跑出来条带也是一样的,但这是因为在cds编码区设计的引物,如果要送测序,建议还是用cdna的,保证没有内含子。
...

谢谢,那你们有没有全都测序呢

发自小木虫Android客户端
人必自助尔后天助之
9楼2015-12-10 09:09:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

苯丙氨酸-PAL

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by lifechuteng at 2015-12-10 09:00:03
cDNA是DNA转录成mRNA之后,逆转录得到的,两者有相同点也有不同。
如果原核,应该是一样的。
真核由于DNA中含有外显子和内含子,可能会造成DNA和cDNA的差别。具体是cDNA中没有内含子序列而DNA中有。
扩增产物条带 ...

谢谢,900bp左右的样子不知道情况理想不,主要时间比较紧,有两个样的cdna扩增条带不明显(rna质量不够好),现在重提来不及。。。

发自小木虫Android客户端
人必自助尔后天助之
10楼2015-12-10 09:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 苯丙氨酸-PAL 的主题更新
信息提示
请填处理意见