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jiangyinshen

木虫 (著名写手)

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[求助] 请教细胞诱导分化实验的套路

我现在正在做干细胞诱导分化实验，就是将三种生长因子加到间充质干细胞培养基中，诱导干细胞向上皮细胞分化，但是实验结果一直不理想，WB结果一直没有好的，诱导组的角蛋白（上皮标记物）表达还没有对照组高，求各位大神指导一下怎么改进？还有如果我想在形态学上观察到干细胞分化，应该选择怎样的实验方案，有没有什么套路？总的来说希望有大神能指导我一下干细胞诱导分化实验的传统套路，我基金马上结题，十万火急，请不吝赐教，谢谢大家指导

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1楼 2015-12-09 15:26:04

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jiangyinshen

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引用回帖:

7楼: Originally posted by cjs8120 at 2015-12-14 19:28:49
我是诱导BMSCs向软骨细胞分化，跟你这个还是有点不同。
请问是否有阳性对照组，与实验组和和空白组比较怎么样?
还有，我问你怎么提取分离的细胞，不仅仅是要知道细胞来源，还想知道你细胞是二维培养还是三维培养?
...

我是二维培养，将MSC诱导分化成上皮，方法很简单，就是将MSC先用公司提供的培养基培养，传代之后实验组加入三种生长因子，低血清培养7-14d，对照组不加生长因子，然后WB检测上皮标记物。但是WB结果不理想，居然出现实验组上皮标记物表达还没对照组高，重复好几遍都是这样，我都疯了！眼下要结题了，不知该怎么办