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SAI_光

新虫 (小有名气)

[求助] 请教未分化pc12细胞的培育及分化实验

各位虫友好，我目前在做pc12细胞的相关实验。有一些问题希望得到虫友们的帮助，先表示感谢！
1，我是从上海典型细胞库购买的未分化pc12，想做神经保护方面的模型，想通过NGF做诱导，用多少浓度的NGF合适呢？
2，看了一些帖子，说用NGF诱导后的pc12会停止增殖，并且贴壁性增强，那么我如何传代呢，既然不再增殖的话？
3，NGF诱导后的pc12如何种板，也是正常胰酶消化，计数后种板，加药吗？
4，用NGF诱导后的细胞我可以冻存一些，然后等以后再复苏使用吗？
5，用NGF进行诱导，似乎48h后就会出现诱导效果，但是往往会诱导7d甚至更多时间，这又是为什么呢？
问题比较多，还请知道的虫友不吝赐教，再次表示感谢！
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1楼 2014-05-02 21:36:16
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2011239043

新虫 (初入文坛)
您好！不知道您现在PC12细胞实验做得怎么样了？你用来诱导分化的培养基是怎么组成的？未分化的细胞不能代表有神经保护作用吗？
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2楼2014-07-20 19:21:17
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SAI_光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2011239043 at 2014-07-20 19:21:17
您好！不知道您现在PC12细胞实验做得怎么样了？你用来诱导分化的培养基是怎么组成的？未分化的细胞不能代表有神经保护作用吗？

用含有10%HS和5%FBS的RIPM1640培养细胞，分化时另加入50ng/ml的NGF。未分化的细胞也可以，但是敏感性很差，当然了，如果你只是想看药物对于细胞的增殖影响，用未分化的就足够了，省去了很多麻烦。很多文献里也都是采用的未分化的pc12细胞进行实验的~
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3楼2014-07-29 08:59:27
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legeng0210

铜虫 (初入文坛)
楼主，我也做这方面的实验，能留一下联系方式么？想咨询一下关于实验方面的问题，谢谢
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4楼2014-08-10 21:45:46
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SAI_光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by legeng0210 at 2014-08-10 21:45:46
楼主，我也做这方面的实验，能留一下联系方式么？想咨询一下关于实验方面的问题，谢谢

邮箱：zhangyiran_ouc@126.com
相互学习，我也有很多不明白的地方
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5楼2014-08-11 19:25:47
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