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SAI_光

新虫 (小有名气)

[求助] 请教未分化pc12细胞的培育及分化实验

各位虫友好,我目前在做pc12细胞的相关实验。有一些问题希望得到虫友们的帮助,先表示感谢!
1,我是从上海典型细胞库购买的未分化pc12,想做神经保护方面的模型,想通过NGF做诱导,用多少浓度的NGF合适呢?
2,看了一些帖子,说用NGF诱导后的pc12会停止增殖,并且贴壁性增强,那么我如何传代呢,既然不再增殖的话?
3,NGF诱导后的pc12如何种板,也是正常胰酶消化,计数后种板,加药吗?
4,用NGF诱导后的细胞我可以冻存一些,然后等以后再复苏使用吗?
5,用NGF进行诱导,似乎48h后就会出现诱导效果,但是往往会诱导7d甚至更多时间,这又是为什么呢?
问题比较多,还请知道的虫友不吝赐教,再次表示感谢!
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2011239043

新虫 (初入文坛)

您好!不知道您现在PC12细胞实验做得怎么样了?你用来诱导分化的培养基是怎么组成的?未分化的细胞不能代表有神经保护作用吗?
2楼2014-07-20 19:21:17
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SAI_光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 2011239043 at 2014-07-20 19:21:17
您好!不知道您现在PC12细胞实验做得怎么样了?你用来诱导分化的培养基是怎么组成的?未分化的细胞不能代表有神经保护作用吗?

用含有10%HS和5%FBS的RIPM1640培养细胞,分化时另加入50ng/ml的NGF。未分化的细胞也可以,但是敏感性很差,当然了,如果你只是想看药物对于细胞的增殖影响,用未分化的就足够了,省去了很多麻烦。很多文献里也都是采用的未分化的pc12细胞进行实验的~
3楼2014-07-29 08:59:27
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legeng0210

铜虫 (初入文坛)

楼主,我也做这方面的实验,能留一下联系方式么?想咨询一下关于实验方面的问题,谢谢
4楼2014-08-10 21:45:46
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SAI_光

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by legeng0210 at 2014-08-10 21:45:46
楼主,我也做这方面的实验,能留一下联系方式么?想咨询一下关于实验方面的问题,谢谢

邮箱:zhangyiran_ouc@126.com
相互学习,我也有很多不明白的地方
5楼2014-08-11 19:25:47
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