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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 请教细胞诱导分化实验的套路
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)

[求助] 请教细胞诱导分化实验的套路

我现在正在做干细胞诱导分化实验，就是将三种生长因子加到间充质干细胞培养基中，诱导干细胞向上皮细胞分化，但是实验结果一直不理想，WB结果一直没有好的，诱导组的角蛋白（上皮标记物）表达还没有对照组高，求各位大神指导一下怎么改进？还有如果我想在形态学上观察到干细胞分化，应该选择怎样的实验方案，有没有什么套路？总的来说希望有大神能指导我一下干细胞诱导分化实验的传统套路，我基金马上结题，十万火急，请不吝赐教，谢谢大家指导
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
1楼 2015-12-09 15:26:04
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cjs8120

木虫 (正式写手)
吱吱，不就是我研究生毕业论文嘛！

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3楼2015-12-12 03:18:12
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jennifermatt

木虫 (小有名气)
干细胞传代次数多了，分化能力会很弱。不知道你的细胞是传代多少次了。我也做过类似的实验，不过不是向上皮分化。不管是二维还是三维培养，细胞分化都是很明显的。基因表达差异也比较显著。各种鉴定染色也是很漂亮。可能是我自己提取细胞，很清楚它的状态。

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求是
12楼2015-12-16 00:21:41
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普通回帖

我爱天津

金虫 (正式写手)
楼主 虽然我不懂 单身帮你默默顶一下帖子
敢问楼主现在是博士还是pi？

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2楼2015-12-12 02:57:50
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)
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3楼: Originally posted by cjs8120 at 2015-12-12 03:18:12
吱吱，不就是我研究生毕业论文嘛！

求大神指教
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
4楼2015-12-13 00:53:06
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cjs8120

木虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by jiangyinshen at 2015-12-13 00:53:06
求大神指教...

细胞提取分离方法?培养方法是什么？

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5楼2015-12-13 01:02:04
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)
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5楼: Originally posted by cjs8120 at 2015-12-13 01:02:04
细胞提取分离方法?培养方法是什么？
...

从公司买的成品，公司鉴定好的间充质干细胞，用公司提供的培养基来培养
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
6楼2015-12-14 17:50:51
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cjs8120

木虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by jiangyinshen at 2015-12-14 17:50:51
从公司买的成品，公司鉴定好的间充质干细胞，用公司提供的培养基来培养...

我是诱导BMSCs向软骨细胞分化，跟你这个还是有点不同。
请问是否有阳性对照组，与实验组和和空白组比较怎么样?
还有，我问你怎么提取分离的细胞，不仅仅是要知道细胞来源，还想知道你细胞是二维培养还是三维培养?

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7楼2015-12-14 19:28:49
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cjs8120 at 2015-12-14 19:28:49
我是诱导BMSCs向软骨细胞分化，跟你这个还是有点不同。
请问是否有阳性对照组，与实验组和和空白组比较怎么样?
还有，我问你怎么提取分离的细胞，不仅仅是要知道细胞来源，还想知道你细胞是二维培养还是三维培养?
...

我是二维培养，将MSC诱导分化成上皮，方法很简单，就是将MSC先用公司提供的培养基培养，传代之后实验组加入三种生长因子，低血清培养7-14d，对照组不加生长因子，然后WB检测上皮标记物。但是WB结果不理想，居然出现实验组上皮标记物表达还没对照组高，重复好几遍都是这样，我都疯了！眼下要结题了，不知该怎么办
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
8楼2015-12-15 18:10:32
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cjs8120

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jiangyinshen at 2015-12-15 18:10:32
我是二维培养，将MSC诱导分化成上皮，方法很简单，就是将MSC先用公司提供的培养基培养，传代之后实验组加入三种生长因子，低血清培养7-14d，对照组不加生长因子，然后WB检测上皮标记物。但是WB结果不理想，居然出现 ...

免疫组化做了吗？结果呢

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9楼2015-12-15 19:02:38
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jiangyinshen

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by cjs8120 at 2015-12-15 19:02:38
免疫组化做了吗？结果呢
...

只做荧光了，组化没做。荧光的结果不是那种特别亮的，所以存疑
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不是風動，亦非幡動，仁者心動
10楼2015-12-15 21:50:31
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