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race产物胶回收后做infusion链接,摇菌之后也很浓,但是涂板之后居然没长菌
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我们有几个基因,有些基因是多条带,有些事单条带,多条带的我们都是切胶分开了的,用的是胶回收试剂盒内的回收液洗脱。接着做infusion连接、转化、涂板,单13个小时后培养板上没长菌,也换过ta克隆,粘性末端克隆,要么没长菌,要么长菌了的挑菌进行pcr之后,凝胶检测什么也没有,只有marker。想了一下把胶回收产物再进行pcr扩增一下,和race巢氏第三轮的循环数一样用了16个循环,检测后条带很弱,又增加了16个循环,效果要好点了,但是有弥散,也不知道后面该怎么做了。5‘race很顺利,怎么3’race这么难呢,大神求解啊![]() ![]() |
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