24小时热门版块排行榜    

查看: 2891  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

srr1990

新虫 (初入文坛)

[求助] 酿酒酵母破壁 已有4人参与

请问各位,有没有用酿酒酵母系统做蛋白表达的?我的是胞内表达,需要破壁,之前查过很多资料,用超声波也试过,破不开。之后用的是酸洗玻璃珠,感觉效果还不错。我不知道小虫子们都是怎么破壁的,因为要测酶活,所以还要保持蛋白的酶活性。我想知道你们都是怎么知道破壁完全的?难道都是破完后用SDS-PAGE检测看是否有条带?
还有,我破壁都是用实验室一般的涡旋振荡器,也就震荡10min左右,都是手动的,而且量也很少,每次破完上清也就200-300ul左右,怕再多破碎效果不好。请教各位,你们有没有比较好的方法?
回复此楼
严谨认真,阳光向上、执着追求自己的科研小世界
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

近水曲澜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 恶魔的左眼 at 2015-12-08 09:53:34
我们实验室做毕赤酵母蛋白表达,一般就是用超声破碎的
你的蛋白表达量是不是很大啊,导致的很难破碎?

请问超声破,你们参数设为多少,用什么做溶剂

发自小木虫Android客户端
13楼2018-01-19 07:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
srr1990: 金币+1 2015-12-09 23:10:17
液氮碾磨当然是最好的。没有的话,我们一般用珠摩仪
2楼2015-12-08 00:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 371522029 at 2015-12-08 00:16:49
液氮碾磨当然是最好的。没有的话,我们一般用珠摩仪

用lyticase消化下,效果好

发自小木虫Android客户端
3楼2015-12-08 07:31:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gnice

金虫 (正式写手)

4楼2015-12-08 07:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 HFw0lei2R37i 2026-08-14 8/400 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-14 22:32 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +5 Ldrop2023 2026-08-13 5/250 2026-08-14 18:48 by ssxclkj
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见