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灵活的胖子1

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎样算多酚氧化酶活力 已有1人参与

就是在变化的吸光度为0.029在420nm下,粗酶液为0.5ml,反应时间为2分钟后,缓冲液为2ml,邻苯二酚为0.5ml,求酶的活力怎么算啊。求大神帮帮忙。
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树小伟_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小沐饮吧 at 2016-06-12 10:18:48
取10ml鲜榨果浆与20ml4%(w/v)PVPP充分混合后在12000r/min离心20min后取上清液,即为PPO粗酶液。取1ml粗酶液于比色皿,加入1ml磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液再加入2ml0.2mol/L邻苯二酚溶液(用pH为6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸 ...

楼主,你现在还在做多酚氧化酶么?
4楼2016-09-26 19:30:30
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小沐饮吧

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

取10ml鲜榨果浆与20ml4%(w/v)PVPP充分混合后在12000r/min离心20min后取上清液,即为PPO粗酶液。取1ml粗酶液于比色皿,加入1ml磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液再加入2ml0.2mol/L邻苯二酚溶液(用pH为6.5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液配制)。(我把酶液稀释2.5、5、10倍都试过)。在波长为420nm处连续3min测定吸光值,以时间为横坐标,吸光值为纵坐标,作出酶活力计算曲线。以吸光值每分钟增加0.001定义为一个酶活力单元,酶活力(R)根据以下公式计算:
R=∆B/∆T÷0.001
式中B——酶活力计算曲线纵坐标, 单位1;
T——酶活力计算曲线横坐标,单位min;
∆B/∆T——酶活力计算曲线中直线部分斜率
3楼2016-06-12 10:18:48
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