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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 放线菌被细菌污染该怎么处理。
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lance-tan

金虫 (小有名气)

[求助] 放线菌被细菌污染该怎么处理。 已有3人参与

从土壤中分离的放线菌，想要进行16s 序列测定，经过扩增测序，BLAST比对发现是沙雷氏菌。于是怀疑是细菌污染，着手验证，然后，挑取斜面种进行划线于高氏培养基上培养3天后，发现并无细菌污染，重新施用SDS法提取DNA，经过测序发现比对仍然是沙雷氏菌，提取DNA的实验药品(能灭菌的），PCR管，以及EP管，水，MIX都是灭菌确认无误的。扩增引物 选用的是 8-27F，1523R。求大神们棒棒忙 我该怎么做。
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新手入门求各位大神指导
1楼 2015-12-05 22:40:35
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371522029

金虫 (正式写手)

小鱼儿
引用回帖:
6楼: Originally posted by lance-tan at 2015-12-07 10:27:43
是这样的，我想做的是对可培养放线菌探究，目的是利用这个地区特有优势，分离出有特殊功能的放线菌，所以原位培养法不太合适；第二，通用引物是参考了文献中的引物，是没有问题的；至于DNA提取方法，怎么多破放线菌 ...

放线菌是属于一类具有分支状菌丝体的细菌，革兰染色为阳性。主要依据为：①同属原核微生物：细胞核无核膜、核仁和真正的染色体；细胞质中缺乏线粒体、内质网等细胞器；核糖体为70S；②细胞结构和化学组成相似：细胞具细胞壁，主要成分为肽聚糖，并含有DPA；放线菌菌丝直径与细菌直径基本相同；③最适生长PH范围与细菌基本相同，一般呈微碱性；④都对溶菌酶和抗生素敏感，对抗真菌药物不敏感；⑤繁殖方式为无性繁殖，遗传特性与细菌相似。
這個说明重溶菌酶法试试。将样品涂布培养一下看看，放线菌菌落和细菌相差很大的。看看能否分离得到想要得菌。

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8楼2015-12-07 14:35:12
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后方大漏勺

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens ) 又称灵杆菌，一种产生鲜红色素的细菌，存在于空气和水中，可生长在动、植物性食品中。为细菌中最小者，约0.5×(0.5～1.0)微米。近球形短杆菌，但形态多样。 粘质沙雷氏菌广泛分布于自然界，是水和土壤中的常居菌群

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2015-12-06 03:03:35
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lance-tan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 后方大漏勺 at 2015-12-06 03:03:35
粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens ) 又称灵杆菌，一种产生鲜红色素的细菌，存在于空气和水中，可生长在动、植物性食品中。为细菌中最小者，约0.5×(0.5～1.0)微米。近球形短杆菌，但形态多样。 粘质沙雷氏菌广泛分 ...

这个百度我都查过的，能帮我看看我的问题吗？谢谢
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新手入门求各位大神指导
3楼2015-12-06 14:40:43
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后方大漏勺

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得这个菌太小了，混在你的菌落里

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2015-12-07 01:02:00
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