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汕头大学海洋科学接受调剂
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小小小新宇

新虫 (初入文坛)

[求助] 生物膜结晶紫染色问题 已有1人参与

小弟近期研究支原体生物形成的定量问题,通过查文献发现生物膜的染色步骤一般为:96孔板培养x小时,去离子水清洗x次,加xx%的结晶紫溶液染色x分钟,再次冲洗以洗去染液,加乙醇显色,测定吸光度。
       求高手解答或探讨:1.用的结晶紫染色液是怎么配置的(用水还是用乙醇),多大浓度合适(看文章中有1%,0.5%和0.1%)?
                                       2.显色是直接加乙醇还是8:2混合的乙醇/丙酮混合液?有什么区别?
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夏至_未至

新虫 (初入文坛)

最近也在做这个,生物膜的测定。于是,撸主会了吗?我们做的是枯草芽孢杆菌的生物膜测定。
2楼2016-03-24 10:11:56
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3楼2017-08-18 12:09:57
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主语

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

结晶紫配在12%的乙醇或者去离子水中都可以,具体的染色浓度依据不同菌株菌膜的多少而定,可以配一个高浓度的比如1%,然后向下做浓度梯度,选一个合适的浓度,
显色的话我们一般是加95%的乙醇,摇床 1 h,
始于足下
4楼2017-08-23 15:03:43
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