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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 生物膜结晶紫染色问题
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小小小新宇

新虫 (初入文坛)

[求助] 生物膜结晶紫染色问题 已有1人参与

小弟近期研究支原体生物形成的定量问题，通过查文献发现生物膜的染色步骤一般为：96孔板培养x小时，去离子水清洗x次，加xx%的结晶紫溶液染色x分钟，再次冲洗以洗去染液，加乙醇显色，测定吸光度。
       求高手解答或探讨：1.用的结晶紫染色液是怎么配置的（用水还是用乙醇），多大浓度合适（看文章中有1%，0.5%和0.1%）？
                                       2.显色是直接加乙醇还是8:2混合的乙醇/丙酮混合液？有什么区别？
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1楼 2015-12-05 21:59:38
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夏至_未至

新虫 (初入文坛)
最近也在做这个，生物膜的测定。于是，撸主会了吗？我们做的是枯草芽孢杆菌的生物膜测定。
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2楼2016-03-24 10:11:56
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khnmxs11
3楼2017-08-18 12:09:57
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主语

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

结晶紫配在12%的乙醇或者去离子水中都可以，具体的染色浓度依据不同菌株菌膜的多少而定，可以配一个高浓度的比如1%，然后向下做浓度梯度，选一个合适的浓度，
显色的话我们一般是加95%的乙醇，摇床 1 h，
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始于足下
4楼2017-08-23 15:03:43
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