| 查看: 1972 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
ELISA提高抗原抗体特异性结合 已有1人参与
|
||
|
请教各位大神！ 我最近在做ELISA，先在酶标板包被抗原，然后加入少量能够和抗原特异性结合的酶标抗体（按理论计算抗原摩尔量远大于酶标抗体），发现就算是怎么增大包被抗原量，酶标抗体（始终定量）最多只能减少30%（通过测反应前后OD值确定），感觉抗原饱和了，为什么会出现这种情况？我想至少结合60%，该怎么做？我只有5金币了，各位大神帮忙分析一下。感激不尽！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有6人回复
11楼2015-12-08 12:31:03
2楼2015-12-06 10:22:31
3楼2015-12-06 20:15:09
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9567.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1486
- 在线: 383.6小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cgkbhf: 金币+5, ★★★很有帮助, 有帮助，谢谢了！！ 2015-12-08 19:05:02
感谢参与，应助指数 +1
cgkbhf: 金币+5, ★★★很有帮助, 有帮助，谢谢了！！ 2015-12-08 19:05:02
|
不知道题主设计这个实验的目的是什么？是进行抗体的定量还是进行抗原和抗体结合活性的测量？ 看样子像是想进行抗原抗体结合活性的测量，这个实验的设计方案应该是包被少量的抗原，抗体做梯度稀释，然后OD值进行四参数拟合，理论上在抗体浓度较高时几个点，信号会在平台期，后面会随浓度下降，抗体的信号也会下降，结合60%的点这个时候是能找到的。 抗原要是过量包被的话，定量的抗体都结合上去了，信号当然不会有太大变化。 注意OD值读数一般仪器的检测极限在3.5-4之间，如果信号在这个范围内，信号值可能就不在线性范围了，信号不可信，也就是说信号不能真实反馈结合的强弱了 |
4楼2015-12-06 21:02:49
