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虫虫笑了

木虫 (小有名气)

[交流] 蛋白分不开怎么办??? 已有2人参与

目前在做天然蛋白的分离,利用HPLC,C18,C8柱都试过,蛋白大约25KD,水溶性,洗脱的时候总是很早出峰,基本没保留,电泳时总有一条杂带在目的蛋白下方,很近,分不开,使用15%SDS-PAGE试过,也分不开,大家都有什么好的意见呢??谢谢~
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1111
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以尝试离子交换的,疏水的,试试,祝顺利。
2楼2015-12-07 13:10:07
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虫虫笑了

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-12-07 13:10:07
可以尝试离子交换的,疏水的,试试,祝顺利。

没做过啊,疏水的离子交换,能不能给举个例子啊?比如哪一种柱子。。。谢谢
1111
3楼2015-12-07 21:18:00
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mamin_369

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
根据你的蛋白的等电点和配置的Buffer的pH 不同,你的蛋白可能带正电或负电,然后选择相应的阳离子交换柱或阴离子交换柱,要是实验室有GE的蛋白纯化仪的话设定程序就OK,这方面知识你随便找一本蛋白质纯化书就有,具体自己看看,加油吧少年

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-12-07 21:42:54
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