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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于tev酶酶切带有融合蛋白的目的蛋白
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wxb2061

银虫 (小有名气)
已领完
关于tev酶酶切带有融合蛋白的目的蛋白
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由于自己的蛋白表达不明显，将它连入带有mbp-tev的28a载体中共表达，之后打算用tev酶切mbp，但是没有效果。
我们酶切有点糙，就是直接用表达tev酶的蛋白上清与目的蛋白上清按一定比例混合酶切，然后检测，，实验室师兄姐之前都有成功，蛋白是不一样的，我最近却没有明显酶切效果，不知大家有没有做的，交流一下！

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1楼 2015-11-30 14:20:12
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yuwj92811

新虫 (小有名气)
★
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我们TEV蛋白都是过柱子纯化后用的，TEV基本上都带有his标签啊
ps：想请教一下，你们设计融合蛋白的时候，会在TEV酶切位点和目标蛋白之间多加连接肽吗？GGGA的那种？加多长呢？总感觉酶切不成功呢。。。
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54楼2016-06-29 19:20:28
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genghansheng2楼
2015-11-30 14:20   回复  
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ZBBcrazy3楼
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铃儿喜欢的4楼
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qq3030874965楼
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291102431xu6楼
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zhangnan77777楼
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阿苏爱学习8楼
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4121179199楼
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fanwangwei10楼
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GANCHAO11楼
2015-11-30 14:20   回复  
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伤心泪12楼
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克刚克勤13楼
2015-11-30 14:20   回复  
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YL32914楼
2015-11-30 14:20   回复  
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