24小时热门版块排行榜    

查看: 2718  |  回复: 8

哥借你肩膀

新虫 (初入文坛)

[求助] OD600和菌浓的关系 已有2人参与

大家好,我最近在做两株乳酸菌的菌浓测定,我的测定方法是:
   1.从平板里挑单菌落接种到50ml液体MRS培养基20小时
   2.4500转 5 分钟离心去培养基,用5mlPBS重悬,再离心,重复三次
   3.用PBS悬浮菌体测OD值,OD值分别为0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,再分别稀释涂布,确定菌浓
   我因为要用这种方法,乳酸菌PBS悬液加入养有肠癌细胞的12孔板里做细胞粘附实验,才没有用培养基做空白,请帮我看看有什么问题吗?谢谢啊!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

齐宝

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主,我最近也要做乳酸菌的细胞粘附试验,看了一些文献,基本上都是乳酸菌体用细胞培养基悬浮的。不知道对不对,可以互相讨论一下。
2楼2015-11-20 14:59:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

3306549

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测OD600先做标曲,OD=1.0的数据不可信
离心都是按G,不知道你的离心机型号,但是不要大于4000G
一般都是用细胞培养液重悬,但注意加的是无双抗的培养液

另外多说句,你这个基本做烂了,我带的本科生才做这个毕业...
3楼2015-11-20 21:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哥借你肩膀

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 齐宝 at 2015-11-20 14:59:20
楼主,我最近也要做乳酸菌的细胞粘附试验,看了一些文献,基本上都是乳酸菌体用细胞培养基悬浮的。不知道对不对,可以互相讨论一下。

好的啊…你也是做乳酸菌的?

发自小木虫Android客户端
4楼2015-11-22 23:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哥借你肩膀

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 3306549 at 2015-11-20 21:14:51
测OD600先做标曲,OD=1.0的数据不可信
离心都是按G,不知道你的离心机型号,但是不要大于4000G
一般都是用细胞培养液重悬,但注意加的是无双抗的培养液

另外多说句,你这个基本做烂了,我带的本科生才做这个毕 ...

嗯啊…我就是用这个方法确定下菌浓,然后要用10八次方到九次方的1ml PBS悬浮液加到细胞孔板里做细胞实验

发自小木虫Android客户端
5楼2015-11-23 00:05:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哥借你肩膀

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 齐宝 at 2015-11-20 14:59:20
楼主,我最近也要做乳酸菌的细胞粘附试验,看了一些文献,基本上都是乳酸菌体用细胞培养基悬浮的。不知道对不对,可以互相讨论一下。

我的细胞是肠癌细胞,我看得文献都是用的PBS悬浮菌加到孔板里的

发自小木虫Android客户端
6楼2015-11-23 00:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

齐宝

铁杆木虫 (正式写手)

我做的也是肠癌细胞,我看的文献基本是用高糖培养基重悬。但是我们是食品相关,可能不一样。估算菌数用吸光值应该可以,就是可能没那么准确.

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-23 08:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

齐宝

铁杆木虫 (正式写手)

楼主,我又看了一下,用DMEM重悬的目的应该是直接加到培养板后就不用补充培养基了。如果你加的菌悬液少的话,也可以再补充培养基。楼主,你开始做了吗?想问下你12孔板,每孔加量是多少啊?我用的24孔板。

发自小木虫Android客户端
8楼2015-11-23 13:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

哥借你肩膀

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 齐宝 at 2015-11-23 13:15:55
楼主,我又看了一下,用DMEM重悬的目的应该是直接加到培养板后就不用补充培养基了。如果你加的菌悬液少的话,也可以再补充培养基。楼主,你开始做了吗?想问下你12孔板,每孔加量是多少啊?我用的24孔板。
...

我用的方法是在孔板里加一毫升PBS悬浮之后,又加了1毫升培养基。
9楼2015-11-23 14:28:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 哥借你肩膀 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +55 医学老男孩 2026-08-13 123/6150 2026-08-19 23:44 by stan_et
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +13 kkkl_v 2026-08-19 13/650 2026-08-19 22:37 by 宝贝虫子
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见