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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 各位老师，为什么同样DNA标本，浓度都可以，扩增1引物时候
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iswearit

铁虫 (初入文坛)

[求助] 各位老师，为什么同样DNA标本，浓度都可以，扩增1引物时候 已有1人参与

为什么同样DNA标本，浓度都可以，扩增1引物时候，全部都很好，扩增2引物的时候有的很亮有的不亮这是怎么回事,DNA浓度也没有问题，退火温度也是摸出来的最合适温度。请各位老师指教
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先得到的未必是好的
1楼 2015-11-15 19:45:10
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sugeng2000

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
1楼: Originally posted by iswearit at 2015-11-15 19:45:10
为什么同样DNA标本，浓度都可以，扩增1引物时候，全部都很好，扩增2引物的时候有的很亮有的不亮这是怎么回事,DNA浓度也没有问题，退火温度也是摸出来的最合适温度。请各位老师指教

引物特异性不够，你重新设计，换一个吧。

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5楼2015-11-16 00:06:57
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51mimi

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-15 22:48:30
模板量过多过少，引物降解，体系混合不均匀等等很多问题都有可能影响结果。

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2楼2015-11-15 20:37:16
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iswearit

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 51mimi at 2015-11-15 20:37:16
模板量过多过少，引物降解，体系混合不均匀等等很多问题都有可能影响结果。

但是我拿着扩其他也都能扩出来，就是扩2有的亮有的不亮。
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先得到的未必是好的
3楼2015-11-15 22:01:15
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51mimi

新虫 (小有名气)
不好分析原因，不清楚你用来做什么，具体怎么做的，缺少必要信息。

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4楼2015-11-15 23:52:13
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