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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌发酵异常现象
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小花木兰

银虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌发酵异常现象 已有2人参与

最近大肠杆菌发酵，总是大罐上移种后几小时内起大量泡沬、PH上升，OD下降同时溶氧上升，但是平板测不到噬菌体，镜检没有发现染菌，同样用5升罐发酵时也现相近情况，接种后3小时左右开始起泡沫，而且溶氧下降到40%～50%又即开始回升到100% 并且一直维持在100%  继续培养约10多小时，又开始出现生长现象，溶氧又慢慢下降直到接近0%，什么原因，不知大家找到没有？
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1楼 2015-11-15 19:37:17
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zeropoint555

新虫 (初入文坛)
不知道楼主的问题找到原因没？我们遇到了同样的问题
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8楼2017-09-07 10:24:19
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hc2015

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.保种，很关键，终浓度甘油10%也就是800vl菌液，200vl50%的灭菌甘油。多保几管，用一管不要反复冻融，负80度或负44度，负20度不行。保种前最好平板在赛一次菌，保菌菌液最好控制在OD1-2之前，最好测序看下你现在的菌有没问题2.优化培养基，减少酵母粉的量，3.优化诱导时的温度，诱导剂终浓度，诱导剂添加时间。先把这些试了再说，不行再交流，祝顺利
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2楼2015-11-16 10:18:23
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a2703521

金虫 (小有名气)

123
溶氧下降到40%-50%又上升到100%用了多长时间？放置10h以后有没有做杂菌方面的检测？还有你的培养基是不是有加抗生素？
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3楼2015-11-19 16:21:04
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小花木兰

银虫 (小有名气)
大约用半小时左右，经检测绝对没有染菌，我也是加了抗生素的。而且以前一直这样做法，好好的
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4楼2015-11-19 19:50:19
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