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L_melody_

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于方法学验证的标曲线性问题已有6人参与

做大鼠体内的药代动力学,其中有一个药物是紫杉醇,已经做过一次预试,根据预试模拟的一套标曲和QC,标曲范围4~3000ng/mL,QC  L:10ng/ml,M:200ng/ml,H:2000ng/ml.发现标曲最后两个高浓度点(1500ng/ml,3000ng/ml)准确度偏低,QC高点也偏低,但是文献中别人用液质做紫杉醇比我的这个范围还要高一倍都可以。所以想请问大家造成标曲高点线性不好的原因大概有几种, 我也好排查一下原因。
PS,昨天做了个纯品标曲,发现纯品的QC高点也偏低,会不会跟配工作溶液时用的枪有关,因为稀释浓度不同我用的移液枪量程也不一样。
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L_melody_

新虫 (初入文坛)

标曲加权用的x平方分之一
2楼2015-11-14 11:52:06
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stingdhk

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
稀释溶液用的是什么呢,会不会是溶解度不好或者有析出导致高浓度偏低
另外也有可能是高浓度饱和或者抑制吧,这个可以减少进样量或者高浓度点稀释后进样确认一下
3楼2015-11-14 13:13:45
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sqlg888

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
各浓度加缓冲液试试
4楼2015-11-14 15:52:11
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L_melody_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by stingdhk at 2015-11-14 13:13:45
稀释溶液用的是什么呢,会不会是溶解度不好或者有析出导致高浓度偏低
另外也有可能是高浓度饱和或者抑制吧,这个可以减少进样量或者高浓度点稀释后进样确认一下

80%的甲醇溶解,进样量1微升。我也考虑过提取溶剂饱和,但是回收率低中高都差不多,而且配的纯品和生物样品都是高浓度偏低,应该可以排除提取溶剂饱和。我尝试一下稀释~~~
5楼2015-11-14 17:17:01
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L_melody_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sqlg888 at 2015-11-14 15:52:11
各浓度加缓冲液试试

请问缓冲液可以起到什么作用。我溶剂里面有0.1%甲酸,提高离子信号。
6楼2015-11-14 17:18:08
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确认下是不是你的检测器本身线性范围就是比别人小些,某些老仪器特别容易出现这样的问题。
7楼2015-11-16 20:58:10
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L_melody_

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yan1984 at 2015-11-16 20:58:10
确认下是不是你的检测器本身线性范围就是比别人小些,某些老仪器特别容易出现这样的问题。

你好,检测器是AB质谱,还是今年才装的新仪器。我现在发现QC和实际加样偏低的问题貌似是属于方法回收率低。
8楼2015-12-05 10:44:57
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yan1984

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by L_melody_ at 2015-12-05 10:44:57
你好,检测器是AB质谱,还是今年才装的新仪器。我现在发现QC和实际加样偏低的问题貌似是属于方法回收率低。...

质谱不懂,抱歉
9楼2015-12-05 17:15:31
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llw1986

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的LLOQ点响应如何?如果相应蛮高你要想办法降低其响应,可以试试把CC和QC所有点用纯水稀释几倍试试。

发自小木虫IOS客户端
10楼2015-12-08 08:33:52
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