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yingyongli

木虫 (小有名气)


[求助] PBS缓冲液疑问 已有3人参与

配好pbs以后,pH为7.3。但加入规定量的NaCl后,再测pH,变成了6.3.

加入食盐,不是应该对PBS的PH没有影响么?为什么会变?怎么解决?谢谢!!
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51mimi

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-15 22:50:51
我也遇到这种问题,特别是配制10倍浓缩液,然后稀释用,一般实验室都是配置浓缩液,浓缩就高盐,稀释后低盐,ph变化,说不应纠结这个的一看就不严谨,我也想知道正确的配制方法。但我觉得就以上原因来说,浓缩液应该是先调ph后加盐,而直接用的工作液先加盐后调ph。

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-15 19:49:36
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唯不忘相思

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
yingyongli: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-11-16 22:04:45
引用回帖:
11楼: Originally posted by yingyongli at 2015-11-16 12:24:40
那所需的各个组分所需的质量应该从何得知呢?网上有一些常用Ph和常用浓度的配方,可是如果变化了呢?怎么个算法?一直搞不清。请教一下。...

你可以参考分子克隆或者在中国知网上下载一些硕士博士论文看看,一般都会附录上一般常用的的缓冲液配方。比如你说的PBS就很常用。像我们实验室一般用的很多,所以就会配成10*pbs的母液,使用时再稀释成1*pbs 。
10*PBS 配方:
NaCl:  80g
KCl:   2g
十二水合磷酸氢二钠: 36.3g
磷酸二氢钾:  2.4g
称量后加双蒸水溶解,定容至一升。

使用时,取一百毫升10*PBS母液,稀释至终体积一升,调节PH,即,常用的1*PBS buffer。。。
14楼2015-11-16 13:39:26
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nanoeye

金虫 (小有名气)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 唯不忘相思 at 2015-11-16 20:58:02
一般常用的不是7.4吗?你使用pbs一般都是处理细胞吧。...

我是想做ph响应 不同ph值材料的变化 不同ph的缓冲液应该怎么配?

发自小木虫IOS客户端
17楼2015-11-16 22:00:29
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普通回帖

awaken2013

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是离子强度影响了ph
我觉得你应该加完nacl之后再调ph

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-11-14 10:48:17
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yingyongli

木虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by awaken2013 at 2015-11-14 10:48:17
应该是离子强度影响了ph
我觉得你应该加完nacl之后再调ph

我配制的方法是,比如0.1M的PBS,pH7.2,1L,NaCl 1.35M
磷酸二氢钠按0.1M,1L,算出所需质量。称量,溶解,定容。
磷酸氢二钠按0.1M,1L,算出所需质量。称量,溶解,定容。
然后取上述所配一定量的磷酸氢二钠,往里加上述所配磷酸二氢钠,调节pH为7.2。记录此时总共的溶液体积,算出所需NaCl,称量,倒进溶液中溶解。

这个方法合理吗?按道理,盐加进去不应该会影响pH啊,是吗?但加盐进去之后变成了6.3。然后我是用NaOH又把溶液调回了pH7.2。
3楼2015-11-14 13:57:42
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nanoeye

金虫 (小有名气)

我也遇到类似问题。同意加盐之后再调ph
4楼2015-11-14 14:10:39
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yingyongli at 2015-11-14 13:57:42
我配制的方法是,比如0.1M的PBS,pH7.2,1L,NaCl 1.35M
磷酸二氢钠按0.1M,1L,算出所需质量。称量,溶解,定容。
磷酸氢二钠按0.1M,1L,算出所需质量。称量,溶解,定容。
然后取上述所配一定量的磷酸氢二钠 ...

离子强度的确会影响解离。一般的化学教材有写。而且纠结这个问题没有意义 把ph调到位就好

发自小木虫IOS客户端
5楼2015-11-14 15:53:26
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唯不忘相思

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-15 22:51:09
yingyongli: 金币+1, 有帮助 2015-11-16 12:23:13
配缓冲液不是应该先称量好各个组分所需的质量,然后混合倒入烧杯内溶解后,再一起定容,最后再测PH值吗?感觉上述说的配置缓冲液的步骤都好繁琐。
6楼2015-11-15 19:29:09
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furongzhen

新虫 (小有名气)

8楼2015-11-16 09:39:52
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
yingyongli: 金币+1 2015-11-16 12:25:42
离子强度的确会影响解离。一般的化学教材有写。而且纠结这个问题没有意义 把ph调到位就好
9楼2015-11-16 11:47:59
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yingyongli

木虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by 51mimi at 2015-11-15 19:49:36
我也遇到这种问题,特别是配制10倍浓缩液,然后稀释用,一般实验室都是配置浓缩液,浓缩就高盐,稀释后低盐,ph变化,说不应纠结这个的一看就不严谨,我也想知道正确的配制方法。但我觉得就以上原因来说,浓缩液应该 ...

能请教一下你具体的配方和操作么?
10楼2015-11-16 12:22:37
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