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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PBS缓冲液疑问
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yingyongli

木虫 (小有名气)

[求助] PBS缓冲液疑问已有3人参与

配好pbs以后，pH为7.3。但加入规定量的NaCl后，再测pH，变成了6.3.

加入食盐，不是应该对PBS的PH没有影响么？为什么会变？怎么解决？谢谢！！
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1楼2015-11-13 21:08:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

51mimi

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-15 22:50:51
我也遇到这种问题，特别是配制10倍浓缩液，然后稀释用，一般实验室都是配置浓缩液，浓缩就高盐，稀释后低盐，ph变化，说不应纠结这个的一看就不严谨，我也想知道正确的配制方法。但我觉得就以上原因来说，浓缩液应该是先调ph后加盐，而直接用的工作液先加盐后调ph。

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7楼2015-11-15 19:49:36
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唯不忘相思

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
yingyongli: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-11-16 22:04:45
引用回帖:
11楼: Originally posted by yingyongli at 2015-11-16 12:24:40
那所需的各个组分所需的质量应该从何得知呢？网上有一些常用Ph和常用浓度的配方，可是如果变化了呢？怎么个算法？一直搞不清。请教一下。...

你可以参考分子克隆或者在中国知网上下载一些硕士博士论文看看，一般都会附录上一般常用的的缓冲液配方。比如你说的PBS就很常用。像我们实验室一般用的很多，所以就会配成10*pbs的母液，使用时再稀释成1*pbs 。
10*PBS 配方：
NaCl:  80g
KCl:   2g
十二水合磷酸氢二钠: 36.3g
磷酸二氢钾:  2.4g
称量后加双蒸水溶解，定容至一升。

使用时，取一百毫升10*PBS母液，稀释至终体积一升，调节PH，即，常用的1*PBS buffer。。。
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14楼2015-11-16 13:39:26
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nanoeye

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 唯不忘相思 at 2015-11-16 20:58:02
一般常用的不是7.4吗？你使用pbs一般都是处理细胞吧。...

我是想做ph响应 不同ph值材料的变化 不同ph的缓冲液应该怎么配？

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17楼2015-11-16 22:00:29
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是离子强度影响了ph
我觉得你应该加完nacl之后再调ph

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2楼2015-11-14 10:48:17
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yingyongli

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by awaken2013 at 2015-11-14 10:48:17
应该是离子强度影响了ph
我觉得你应该加完nacl之后再调ph

我配制的方法是，比如0.1M的PBS，pH7.2，1L，NaCl 1.35M
磷酸二氢钠按0.1M，1L，算出所需质量。称量，溶解，定容。
磷酸氢二钠按0.1M，1L，算出所需质量。称量，溶解，定容。
然后取上述所配一定量的磷酸氢二钠，往里加上述所配磷酸二氢钠，调节pH为7.2。记录此时总共的溶液体积，算出所需NaCl，称量，倒进溶液中溶解。

这个方法合理吗?按道理，盐加进去不应该会影响pH啊，是吗？但加盐进去之后变成了6.3。然后我是用NaOH又把溶液调回了pH7.2。
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3楼2015-11-14 13:57:42
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nanoeye

金虫 (小有名气)
我也遇到类似问题。同意加盐之后再调ph
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4楼2015-11-14 14:10:39
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awaken2013

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yingyongli at 2015-11-14 13:57:42
我配制的方法是，比如0.1M的PBS，pH7.2，1L，NaCl 1.35M
磷酸二氢钠按0.1M，1L，算出所需质量。称量，溶解，定容。
磷酸氢二钠按0.1M，1L，算出所需质量。称量，溶解，定容。
然后取上述所配一定量的磷酸氢二钠 ...

离子强度的确会影响解离。一般的化学教材有写。而且纠结这个问题没有意义 把ph调到位就好

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5楼2015-11-14 15:53:26
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唯不忘相思

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-11-15 22:51:09
yingyongli: 金币+1, ★有帮助 2015-11-16 12:23:13
配缓冲液不是应该先称量好各个组分所需的质量，然后混合倒入烧杯内溶解后，再一起定容，最后再测PH值吗？感觉上述说的配置缓冲液的步骤都好繁琐。
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6楼2015-11-15 19:29:09
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furongzhen

新虫 (小有名气)
会有影响的

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8楼2015-11-16 09:39:52
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yingyongli: 金币+1 2015-11-16 12:25:42
离子强度的确会影响解离。一般的化学教材有写。而且纠结这个问题没有意义 把ph调到位就好
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9楼2015-11-16 11:47:59
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yingyongli

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 51mimi at 2015-11-15 19:49:36
我也遇到这种问题，特别是配制10倍浓缩液，然后稀释用，一般实验室都是配置浓缩液，浓缩就高盐，稀释后低盐，ph变化，说不应纠结这个的一看就不严谨，我也想知道正确的配制方法。但我觉得就以上原因来说，浓缩液应该 ...

能请教一下你具体的配方和操作么?
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10楼2015-11-16 12:22:37
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