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lifeifei88

铜虫 (小有名气)

[求助] 制备色谱问题 已有2人参与

制备液相,用快速过滤柱分离我的杂质,峰分的很好,为什么接馏份进液相非常不纯呢?我需要的是20分钟的杂质,在峰出的最高时接一点馏份进的液相,才有30%的20分钟的杂质,为什么?请赐教!

制备色谱问题


制备色谱问题-1


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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
馏分中杂质是15分钟的峰么?
归零
2楼2015-11-12 15:23:59
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
xl_pro: 金币+2, 感谢你的应助,辛苦了! 2015-11-12 22:24:07
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifeifei88 at 2015-11-12 15:51:38
是的,收集20分钟的馏份,进液相时15分钟的杂质占60%,而20分钟的峰只有30%,这是为什么?请赐教,谢谢啦
...

你接馏分时没有扣除检测器后管路长度,因此,你开始接馏分的时候,15分钟的峰实际还在管路中,也被同时接收了。你要计算一下检测器至馏分收集口之间的管路体积,延迟收集就不会有问题了。
归零
4楼2015-11-12 15:54:34
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普通回帖

lifeifei88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2015-11-12 15:23:59
馏分中杂质是15分钟的峰么?

是的,收集20分钟的馏份,进液相时15分钟的杂质占60%,而20分钟的峰只有30%,这是为什么?请赐教,谢谢啦

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3楼2015-11-12 15:51:38
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by klicking at 2015-11-12 15:54:34
你接馏分时没有扣除检测器后管路长度,因此,你开始接馏分的时候,15分钟的峰实际还在管路中,也被同时接收了。你要计算一下检测器至馏分收集口之间的管路体积,延迟收集就不会有问题了。...

检测器至馏分收集口之间长最多一米,管直径最多2mm,延迟体积最多20ml。我是40ml/min的流速,一分钟肯定能流完吧,况且,我是等了3min以后,在20min的峰高最高时接的馏份,怎么还有60%的15min的峰呢。你以前遇到过这种情况吗?

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5楼2015-11-12 19:46:48
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifeifei88 at 2015-11-12 19:46:48
检测器至馏分收集口之间长最多一米,管直径最多2mm,延迟体积最多20ml。我是40ml/min的流速,一分钟肯定能流完吧,况且,我是等了3min以后,在20min的峰高最高时接的馏份,怎么还有60%的15min的峰呢。你以前遇到过 ...

分离度这样好的没遇到过,我们一般是直接在检测器外端接馏分,忽略延迟作用,我们没有馏分收集器。
你的情况,建议分段收集目标馏分试试看,还有约1米长的管路,建议仔细核对其真实体积,以便计算延迟时间。
归零
6楼2015-11-12 23:05:24
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by klicking at 2015-11-12 23:05:24
分离度这样好的没遇到过,我们一般是直接在检测器外端接馏分,忽略延迟作用,我们没有馏分收集器。
你的情况,建议分段收集目标馏分试试看,还有约1米长的管路,建议仔细核对其真实体积,以便计算延迟时间。...

还是谢谢你

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7楼2015-11-13 21:14:26
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lifeifei88: 金币+3 2015-11-14 09:17:25
首先确定你的制备柱能看见所有的几个峰。如果分离度不够,大家一起出来,峰形再漂亮也没有用。

另外既然你要后面的组分,就不要从峰顶接,而是选择下降沿接收。

再有一个可能是你的化合物不稳定,在溶液中会变回15分钟那个物种。

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8楼2015-11-13 23:04:01
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by superyeast at 2015-11-13 23:04:01
首先确定你的制备柱能看见所有的几个峰。如果分离度不够,大家一起出来,峰形再漂亮也没有用。
另外既然你要后面的组分,就不要从峰顶接,而是选择下降沿接收。
再有一个可能是你的化合物不稳定,在溶液中会变回15分 ...

首先谢谢你的回复。
我有个问题,峰分的很开了,分离度还不够吗?怎么确定分离度够了呢?还有,如果正常的话在20分钟出峰时去掉延迟体积就可以接了,为什么要等到下沿才接呢?谢谢

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9楼2015-11-14 09:20:55
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

你贴的是制备柱的谱还是分析柱的谱?请把另一个贴出来。

如果你是把制备柱的组分又打回制备柱去分析,还是只有30%的纯度,那么多半是稳定性有问题。

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10楼2015-11-14 12:38:41
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