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[交流]
PCR产物为什么切不开
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我做的是PCR-RFLP法分析SNP: 引物是参照文献设计,takara合成的。 订购的是takara的Taq酶。 PCR 条件也是文献中的,1%琼脂糖电泳显示PCR产物大小为290bp。 用文献报道的Msp I 1μL,PCR产物10μL,酶切4小时(16小时也切过),3%琼脂糖电泳显示产物为310bp左右。 切开的片段应该为168bp和122bp。 为什么酶切产物变大了?为什么PCR产物没有被切开呢? 试了很多次都不行,也换过很多模板,但都是这种情况,takara书上说可能是蛋白质的影响,但是酶切产物电泳同时使用了内切酶提供的10×buffer还是这种情况,是在是困惑!谢谢大家 |
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