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yumeng_6964

金虫 (小有名气)

[求助] 多肽的TEM 已有1人参与

我想问一下各位大神
我想做的是多肽为DNA载体的,所以想看TEM图片中多肽的大小会不会变化,从一个方面验证是否连接上。
但我之前没做过,请问该怎么做?是不是要染色?
麻烦啦~
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atpbrave

铁杆木虫 (著名写手)

Prof

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yumeng_6964: 金币+8, ★★★很有帮助, 谢谢!我也问过身边做多肽的,他们也是这样回答的。我决定用凝胶电泳和zeta点位来证明。 2015-11-06 09:03:46
生物分子类样品做TEM一般都要染色,不过你要做的事八成做不出来。你的问题提的不是很清楚,所以回答也只能宽泛些。如果你是用共价键连接多肽和DNA,然后想用TEM观察大小来确定是否连接成功,那么几乎办不到。你既然说是多肽,那么怎么也不会太大吧,通常有30个AA就算不小了,那也就几kD,每个分子才两三纳米,加上个不知大小的DNA,总共也没多大,用负染色TEM的话根本很难分辨。而且多肽样品很可能会团聚,除非你设计他们不团聚或者固定形成多少聚体,否则多肽自己的团聚体尺寸都不是固定的。其实我觉得要看是否连接上,跑个胶就行了吧。
2楼2015-11-06 04:38:24
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yumeng_6964

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atpbrave at 2015-11-06 04:38:24
生物分子类样品做TEM一般都要染色,不过你要做的事八成做不出来。你的问题提的不是很清楚,所以回答也只能宽泛些。如果你是用共价键连接多肽和DNA,然后想用TEM观察大小来确定是否连接成功,那么几乎办不到。你既然 ...

谢谢!我也问过身边做多肽的,并仔细考虑过这个问题。
我决定用凝胶电泳和zeta电位来证明。
3楼2015-11-06 09:04:58
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