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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[交流] 请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么,怎样去掉呢 已有18人参与

请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么,怎样去掉呢
比如这个

我用的上样缓冲液里有溴酚蓝,请问这个是溴酚蓝吗?
我的目的蛋白条带估算是10KDa,这条带特别宽,会影响观察的啊···
反正这条带下面基本上什么都没有

另外,用的marker明明有9条带,经常只能看到7条是怎么回事呢?
难道另外两条在这条带里面吗?

请问有没有办法解决这个问题呢?我看别人做的SDS-PAGE很多都没有这条带的啊
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Yinger元

新虫 (初入文坛)


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是溴酚蓝,计算相对迁移率的时候的基线。

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2楼2015-11-03 14:49:24
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Yinger元

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该是是你没数清楚,既然溴酚蓝没跑出胶,marker的条带应该都在

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3楼2015-11-03 14:51:55
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郑凤席

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我记得我们老师说是跑胶的时间没够,还没跑到底

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4楼2015-11-03 15:09:40
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 郑凤席 at 2015-11-03 15:09:40
我记得我们老师说是跑胶的时间没够,还没跑到底

跑到底的话不会都跑出去了吗?想不明白

刚才问了一下我们老师也说再跑跑,不过我们老师也不是很懂,说了我也没听明白···

难道真要再跑吗?在电泳的时候看不到这些条带,只能看到点的样在一点一点往下移

一般我看到移到快底下了才结束的

难道还要再跑?再跑全都在底下了呀
5楼2015-11-03 15:18:54
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liweiwaxmc

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-11-03 23:03:37
溴酚蓝一般是作为指示剂,告诉你电泳大概跑到什么程度!如果跑到胶的边缘位置,就表明实验可以结束了,如果再不结束,小的蛋白可能就会跑出去!
看客官的溴酚蓝条带不太正常,有弥散的可能!注意分离胶的配置,包括试剂用量和凝结时间!正常情况下,溴酚蓝应该是一条窄的条带!要去除直接切掉就可以了!

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6楼2015-11-03 15:38:29
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lylyly2006

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
溴酚蓝不要按照书上的质量称,减量到1/4就可以了,只是一个指示剂,那条带就很细了

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7楼2015-11-03 15:53:12
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2015年学霸

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
7楼: Originally posted by lylyly2006 at 2015-11-03 15:53:12
溴酚蓝不要按照书上的质量称,减量到1/4就可以了,只是一个指示剂,那条带就很细了

溴酚蓝加的太少的话,蛋白在上样的时候会飘起来吗?
8楼2015-11-03 16:13:13
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 2015年学霸 at 2015-11-03 16:13:13
溴酚蓝加的太少的话,蛋白在上样的时候会飘起来吗?...

个人觉得影响上样缓冲液密度的成分主要是甘油

如果说溴酚蓝只是指示剂的话

如果还飘的话就继续加甘油吧,纯的
9楼2015-11-03 16:20:40
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gemengkai

铜虫 (初入文坛)


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能问一下你用的是百分之多少的胶,我觉得你应该加大胶浓度,延长跑胶时间,让溴酚蓝跑出去

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-11-03 16:41:13
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