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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么，怎样去掉呢
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

[交流] 请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么，怎样去掉呢 已有18人参与

请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么，怎样去掉呢
比如这个

我用的上样缓冲液里有溴酚蓝，请问这个是溴酚蓝吗？
我的目的蛋白条带估算是10KDa，这条带特别宽，会影响观察的啊···
反正这条带下面基本上什么都没有

另外，用的marker明明有9条带，经常只能看到7条是怎么回事呢？
难道另外两条在这条带里面吗？

请问有没有办法解决这个问题呢？我看别人做的SDS-PAGE很多都没有这条带的啊
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1楼 2015-11-03 14:46:42
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Yinger元

新虫 (初入文坛)
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是溴酚蓝，计算相对迁移率的时候的基线。

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2楼2015-11-03 14:49:24
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Yinger元

新虫 (初入文坛)
★
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应该是是你没数清楚，既然溴酚蓝没跑出胶，marker的条带应该都在

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3楼2015-11-03 14:51:55
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郑凤席

新虫 (小有名气)
★
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我记得我们老师说是跑胶的时间没够，还没跑到底

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4楼2015-11-03 15:09:40
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 郑凤席 at 2015-11-03 15:09:40
我记得我们老师说是跑胶的时间没够，还没跑到底

跑到底的话不会都跑出去了吗？想不明白

刚才问了一下我们老师也说再跑跑，不过我们老师也不是很懂，说了我也没听明白···

难道真要再跑吗？在电泳的时候看不到这些条带，只能看到点的样在一点一点往下移

一般我看到移到快底下了才结束的

难道还要再跑？再跑全都在底下了呀
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5楼2015-11-03 15:18:54
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liweiwaxmc

铜虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-11-03 23:03:37
溴酚蓝一般是作为指示剂，告诉你电泳大概跑到什么程度！如果跑到胶的边缘位置，就表明实验可以结束了，如果再不结束，小的蛋白可能就会跑出去！
看客官的溴酚蓝条带不太正常，有弥散的可能！注意分离胶的配置，包括试剂用量和凝结时间！正常情况下，溴酚蓝应该是一条窄的条带！要去除直接切掉就可以了！

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6楼2015-11-03 15:38:29
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lylyly2006

木虫 (正式写手)
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溴酚蓝不要按照书上的质量称，减量到1/4就可以了，只是一个指示剂，那条带就很细了

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7楼2015-11-03 15:53:12
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2015年学霸

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by lylyly2006 at 2015-11-03 15:53:12
溴酚蓝不要按照书上的质量称，减量到1/4就可以了，只是一个指示剂，那条带就很细了

溴酚蓝加的太少的话，蛋白在上样的时候会飘起来吗？
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8楼2015-11-03 16:13:13
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 2015年学霸 at 2015-11-03 16:13:13
溴酚蓝加的太少的话，蛋白在上样的时候会飘起来吗？...

个人觉得影响上样缓冲液密度的成分主要是甘油

如果说溴酚蓝只是指示剂的话

如果还飘的话就继续加甘油吧，纯的
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9楼2015-11-03 16:20:40
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gemengkai

铜虫 (初入文坛)
★
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能问一下你用的是百分之多少的胶，我觉得你应该加大胶浓度，延长跑胶时间，让溴酚蓝跑出去

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10楼2015-11-03 16:41:13
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