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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 请问SDS-PAGE跑完之后胶上的一条蓝色长线是什么，怎样去掉呢
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bhl2012

银虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by 2015年学霸 at 2015-11-03 16:13:13
溴酚蓝加的太少的话，蛋白在上样的时候会飘起来吗？...

让样不飘的是甘油。溴酚兰只是指示剂

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11楼2015-11-03 18:04:22
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Jondans11

新虫 (初入文坛)
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1楼: Originally posted by sdjnyxn123 at 2015-11-03 14:46:42
比如这个

我用的上样缓冲液里有溴酚蓝，请问这个是溴酚蓝吗？
我的目的蛋白条带估算是10KDa，这条带特别宽，会影响观察的啊···
反正这条带下面基本上什么都没有

另外，用的marker明明有9条带，经常只能 ...

你这是没有跑够时间。正常要这条线跑出胶外后才停止跑。所以最好重新跑。没有办法去掉他的。

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12楼2015-11-03 18:10:29
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by gemengkai at 2015-11-03 16:41:13
能问一下你用的是百分之多少的胶，我觉得你应该加大胶浓度，延长跑胶时间，让溴酚蓝跑出去

我分离胶是15%，溴酚蓝的速度不跟随胶的浓度变化吗？我打算用18%或者20%的试试
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13楼2015-11-03 18:47:20
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冉冉泪无痕

金虫 (初入文坛)

孤独行者
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就是溴酚蓝   没跑出来可能是因为条带没分开

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努力
14楼2015-11-03 19:13:09
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knightdream

金虫 (初入文坛)
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跑胶时间不够，一般要把这条溴酚蓝带刚跑出胶时，时间正合适。你这个跑的时间太短了。
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15楼2015-11-03 19:28:12
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)
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可能是上样buffer配的不太好吧
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16楼2015-11-03 21:57:19
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
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浓缩胶太短了，样品没浓缩好

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17楼2015-11-03 22:16:49
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咖啡小屋~~

新虫 (正式写手)
★
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看楼主的浓缩胶确实很短，我也不知道浓度是否可以弥补短的缺陷，可以更好的压缩蛋白，若是胶板整体太短，楼主不妨试试。
溴酚蓝跑出来应该是一条细细的亮带，不知道楼主的胶是不是在电压停止后在电泳槽中放久了，看样子是弥散掉了，而且建议再跑一段，直到溴酚蓝刚要跑出底面，可以最大限度的利用分离胶。

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每天进步一点点
18楼2015-11-03 23:02:56
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)
★
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溴酚蓝代表了某种特定浓度下sds Page的分离极限，那一团里不仅有溴酚蓝，还有剩下的全部没有分离开的蛋白质，比如你发现的不见了的两条较小marker，提高胶浓度，直到你想要的大小marker能够出来。去看你买的marker的说明书，既然提供了这么小的marker，按说明书的条件跑肯定可以看见。

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19楼2015-11-03 23:04:53
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方宸侍煜

金虫 (小有名气)
★
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唔，首先说下刚开始做分子实验，就说些经验，不当之处欢迎指正，。我也做page胶，不过是做dna的。预电泳不够的话，溴芬兰会越跑越弥散，就是会越跑越粗，很烦人

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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20楼2015-11-04 01:10:04
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