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bhl2012

银虫 (小有名气)


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8楼: Originally posted by 2015年学霸 at 2015-11-03 16:13:13
溴酚蓝加的太少的话,蛋白在上样的时候会飘起来吗?...

让样不飘的是甘油。溴酚兰只是指示剂

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11楼2015-11-03 18:04:22
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Jondans11

新虫 (初入文坛)


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1楼: Originally posted by sdjnyxn123 at 2015-11-03 14:46:42
比如这个

我用的上样缓冲液里有溴酚蓝,请问这个是溴酚蓝吗?
我的目的蛋白条带估算是10KDa,这条带特别宽,会影响观察的啊···
反正这条带下面基本上什么都没有

另外,用的marker明明有9条带,经常只能 ...

你这是没有跑够时间。正常要这条线跑出胶外后才停止跑。所以最好重新跑。没有办法去掉他的。

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12楼2015-11-03 18:10:29
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sdjnyxn123

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by gemengkai at 2015-11-03 16:41:13
能问一下你用的是百分之多少的胶,我觉得你应该加大胶浓度,延长跑胶时间,让溴酚蓝跑出去

我分离胶是15%,溴酚蓝的速度不跟随胶的浓度变化吗?我打算用18%或者20%的试试
13楼2015-11-03 18:47:20
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冉冉泪无痕

金虫 (初入文坛)

孤独行者


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就是溴酚蓝   没跑出来可能是因为条带没分开

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努力
14楼2015-11-03 19:13:09
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knightdream

金虫 (初入文坛)


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跑胶时间不够,一般要把这条溴酚蓝带刚跑出胶时,时间正合适。你这个跑的时间太短了。
15楼2015-11-03 19:28:12
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)


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可能是上样buffer配的不太好吧
16楼2015-11-03 21:57:19
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)


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浓缩胶太短了,样品没浓缩好

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17楼2015-11-03 22:16:49
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咖啡小屋~~

新虫 (正式写手)


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看楼主的浓缩胶确实很短,我也不知道浓度是否可以弥补短的缺陷,可以更好的压缩蛋白,若是胶板整体太短,楼主不妨试试。
溴酚蓝跑出来应该是一条细细的亮带,不知道楼主的胶是不是在电压停止后在电泳槽中放久了,看样子是弥散掉了,而且建议再跑一段,直到溴酚蓝刚要跑出底面,可以最大限度的利用分离胶。

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每天进步一点点
18楼2015-11-03 23:02:56
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)


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溴酚蓝代表了某种特定浓度下sds Page的分离极限,那一团里不仅有溴酚蓝,还有剩下的全部没有分离开的蛋白质,比如你发现的不见了的两条较小marker,提高胶浓度,直到你想要的大小marker能够出来。去看你买的marker的说明书,既然提供了这么小的marker,按说明书的条件跑肯定可以看见。

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19楼2015-11-03 23:04:53
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方宸侍煜

金虫 (小有名气)


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唔,首先说下刚开始做分子实验,就说些经验,不当之处欢迎指正,。我也做page胶,不过是做dna的。预电泳不够的话,溴芬兰会越跑越弥散,就是会越跑越粗,很烦人

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
20楼2015-11-04 01:10:04
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