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hiTail-PCR引物设计
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最近要做hiTail-PCR,也是第一次做,现在在设计引物,简并引物是已知的,但在特异性引物设计上遇到一点问题: 1、三条特异性引物的长度上有什么要求? 2、我看参考文献上(liu and chen ,2007)说特异性引物的退火温度在65-68度,但我在有些论坛上看说要68度以上,还有的说是65度左右,到底特异性引物的退火温度的标准是多少? 3、有的论坛说做第一轮PCR的时候可以把简并引物混一块做,可以么? 4、hiTail-PCR的程序完全按照参考文献(liu and chen ,2007)上的做?有没有需要改动的? 非常感谢各位大侠相助!!!! |
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2楼2015-11-03 00:04:05
3楼2015-11-03 08:06:43
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