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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 转化涂板加kana和氨苄有区别么，还有阴性对照？
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scofield111

银虫 (正式写手)

[求助] 转化涂板加kana和氨苄有区别么，还有阴性对照？ 已有3人参与

请问为什么加入抗生素的平板，阳性克隆就能生长，还有阴性对照怎么做？是要培养的菌直接图在平板上么
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1楼 2015-11-02 17:48:53
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liping121200

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
氨苄和卡那都是根据你载体上的筛选基因来定的，阳性能在相应抗生素的平板上生长，菌液pcr可以作为一定程度的参考，但是对于要求高的，最好做个酶切鉴定，反正最后都要送测序，测序最能说明问题。
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好好学习，天天向上
9楼2015-11-04 12:11:13
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jeff瓜瓜

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不是加了抗生素你的班子上才长菌，抗生素的目的是为了筛选。你转化的质粒上带有相应的抗生素的抗性，能在那种抗生素存在的情况下生长，而没有转成功的则不能生长。也就是说理论上只有转进去质粒的大肠杆菌才能长在抗性板上，但是后期还需要PCR的验证
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2楼2015-11-02 18:30:05
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lihanxuan93

铁杆木虫 (知名作家)
～～

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3楼2015-11-02 18:46:59
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scofield111

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jeff瓜瓜 at 2015-11-02 18:30:05
不是加了抗生素你的班子上才长菌，抗生素的目的是为了筛选。你转化的质粒上带有相应的抗生素的抗性，能在那种抗生素存在的情况下生长，而没有转成功的则不能生长。也就是说理论上只有转进去质粒的大肠杆菌才能长在抗 ...

后期做菌落pcr验证是么

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4楼2015-11-03 00:09:23
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