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构建表达载体后发现有移码，后修改没有成功 已有1人参与
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| 我用PCDNA构建的表达载体，在ECOR1和NOT1中间插入基因片段，第一次构建出的表达载体测序发现NOT1的GCGGCCGC序列变成了AGCGGCCGCA，（前面的A是我本来为了防止移码加上的，后面的A是以前别人用这个质粒时加在后面的基因上的我一开始没有发现）。总之多了一个碱基，之后想修改，就把下游引物上我加入的T给去了，然后重新构建，结果第二次测序结果出来跟第一次是一样的，还是AGCGGCCGCA。。不知道出了什么问题呢？还是我用的方法不对，不应该这么修改呢？求大神~~ |
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【答案】应助回帖
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taq酶会加A么，多测几个吧 发自小木虫IOS客户端 |
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latitudezy
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