| 查看: 5834 | 回复: 5 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
踏雪无痕love金虫 (正式写手)
|
[求助]
引物合成回来后，前后引物的Tm值相差将近9度，问PCR时退火温度该如何设定？ 已有4人参与
|
|
| 如题，在此请教各位虫友，遇到这种情况该怎么办？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有64人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
hcf321283
木虫 (小有名气)
- 应助: 27 (小学生)
- 金币: 4004.2
- 散金: 10
- 红花: 2
- 帖子: 183
- 在线: 42.6小时
- 虫号: 3470801
- 注册: 2014-10-12
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2015-10-27 09:35:15
seo.d_park
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 6488.3
- 散金: 3
- 红花: 2
- 帖子: 309
- 在线: 61小时
- 虫号: 2612814
- 注册: 2013-08-23
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
建议你 用gradient 方法 测试 一下 引物 退火温度， 比如A 是56度 B是 65度 ，取4-6个温度点（56，58，60，62，64） ，cycle 首先 试试30周期， 如果某个温度点能有条带能观察到，再降低 周期数。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2015-10-27 08:16:00
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
3楼2015-10-27 08:16:26
199006287956
木虫 (著名写手)
- 应助: 44 (小学生)
- 金币: 1662
- 散金: 1884
- 红花: 16
- 帖子: 1430
- 在线: 207.6小时
- 虫号: 2344563
- 注册: 2013-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
没有严格的规定说相差9度就不能跑出条带，最好是相差不多，退火温度50-65都可以，48度也行，48度以下的退火温度没有用过，本人习惯52-60度左右。本站有资料，下载自己看一下，设计引物稍微注意一下设计原则基本无碍。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-10-27 08:16:38
100